【摘要】：目的:評(píng)價(jià)大鼠膝關(guān)節(jié)內(nèi)側(cè)副韌帶離斷+內(nèi)側(cè)半月板切除制作骨關(guān)節(jié)炎(OA)模型的方法的可行性,探討MMP-13和ADAMTS-5蛋白在大鼠骨關(guān)節(jié)炎模型不同時(shí)期軟骨組織中的表達(dá)情況。方法:雌性SD大鼠40只,隨機(jī)數(shù)字法分為模型組(n=30)和假手術(shù)組(n=10),模型組大鼠采用膝關(guān)節(jié)內(nèi)側(cè)副韌帶離斷+內(nèi)側(cè)半月板切除制作膝OA模型,假手術(shù)組大鼠打開(kāi)膝關(guān)節(jié)囊后縫合。模型組大鼠分別于術(shù)后4、6、8周處死,假手術(shù)組大鼠于術(shù)后8周處死。解剖大鼠術(shù)側(cè)膝關(guān)節(jié),對(duì)退變關(guān)節(jié)軟骨大體觀察,進(jìn)行軟骨損傷評(píng)分;行HE染色組織學(xué)觀察;剩余軟骨組織分別采用Western blot技術(shù)及免疫組化方法測(cè)定假手術(shù)組與模型組不同時(shí)期軟骨組織中MMP-13和ADAMTS-5蛋白表達(dá)情況。結(jié)果:(1)大體觀察結(jié)果顯示:模型組術(shù)后4周即可見(jiàn)軟骨退變,6周和8周時(shí)退變進(jìn)一步加重,假手術(shù)組無(wú)明顯軟骨退變。不同組別相比大鼠關(guān)節(jié)軟骨損傷評(píng)分差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(2)HE染色結(jié)果顯示:假手術(shù)組大鼠右膝關(guān)節(jié)軟骨面光滑,軟骨細(xì)胞數(shù)量正常;模型組術(shù)后4周大鼠右膝關(guān)節(jié)軟骨面可見(jiàn)糜爛或淺潰瘍,關(guān)節(jié)表層軟骨細(xì)胞少許丟失;模型組術(shù)后6周大鼠右膝關(guān)節(jié)軟骨面可見(jiàn)較深裂隙,呈潰瘍、糜爛,少量軟骨面剝脫;模型組術(shù)后8周大鼠右膝關(guān)節(jié)軟骨面可見(jiàn)大部分軟骨面剝脫,關(guān)節(jié)表層軟骨細(xì)胞大部分丟失。(3)Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示,MMP-13及ADAMTS-5的蛋白表達(dá)在假手術(shù)組水平均較低。MMP-13蛋白表達(dá)于造模4周時(shí)開(kāi)始升高,到造模第6周時(shí)持續(xù)升高,造模第8周是表達(dá)水平較前降低。假手術(shù)組、造模4周組、造模6周組和造模8周組之間蛋白表達(dá)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。ADAMTS-5造模6周時(shí)開(kāi)始升高,造模8周時(shí)維持之前表達(dá)水平。假手術(shù)組與造模4周組相比蛋白表達(dá)水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),假手術(shù)組分別與造模6周組和造模8周組之間相比蛋白表達(dá)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),造模4周組分別與造模6周組和造模8周組之間相比蛋白表達(dá)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),造模6周組和造模8周組相比大鼠關(guān)節(jié)軟骨組織中蛋白表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。免疫組化檢測(cè)蛋白表達(dá)趨勢(shì)與Western blot檢測(cè)結(jié)果一致。結(jié)論:采用膝關(guān)節(jié)內(nèi)側(cè)副韌帶離斷+內(nèi)側(cè)半月板切除的方法可建立動(dòng)物OA模型;MMP-13和ADAMTS-5在OA發(fā)病過(guò)程中的不同時(shí)期表達(dá)水平有明顯變化,可作為OA防治研究中的評(píng)價(jià)指標(biāo),仍需要進(jìn)一步的研究來(lái)探討其相關(guān)信號(hào)通路。
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R684.3;R-332

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2753842