【摘要】：結直腸癌(CRC)是最常見的嚴重威脅人類生命健康的高發(fā)惡性腫瘤之一,全球發(fā)病率居第三位,且一旦發(fā)生轉移,病死率會大幅提高。有研究顯示,生殖器官是該病的主要轉移器官之一,且約占非生殖器官來源的轉移性卵巢癌的62.9%。但結直腸癌在生殖器官部位轉移的過程和治療方法以及相關藥物的研究都鮮有報道。且目前結直腸癌轉移相關機制尚未明確,移植動物模型該病的研究中仍有著重要價值�；谝陨显�,建立一種穩(wěn)定發(fā)生在生殖器官部位的結直腸癌腫瘤動物模型對于研究結直腸癌轉移后的治療方法與抗腫瘤藥物研發(fā)就具有重要的意義。本研究以BALB/c小鼠為試驗對象,將小鼠按性別分為A、C(雄性)和B、D(雌性)四個試驗組各50只。為避免成瘤位置擴散,均采用CT26細胞經(jīng)皮下傳3代培養(yǎng)后制成的細胞懸液,分別通過纖維蛋白凝膠移植接種(A、B組)和荷包縫合移植接種(C、D組)兩種手術方法,外科微創(chuàng)手術移植固定于小鼠生殖器官皮下,觀察小鼠生理狀況、成瘤率、移植瘤成長形狀,并和對照組(僅采取皮下注射腫瘤細胞懸液方式)建模成功率進行比較分析,留瘤體組織標本做病理切片。通過SPSS19.0統(tǒng)計學分析以評判建立更為穩(wěn)定、經(jīng)濟、高效的建模方法。結果顯示:1.纖維蛋白凝膠移植接種試驗組綜合成瘤率(72%)顯著高于荷包縫合移植接種試驗組綜合成瘤率(59%)(P0.05);2.CT26細胞株皮下傳代培養(yǎng)移植試驗組綜合成活率(131/200)65.50%極顯著高于皮下注射原代CT26細胞懸液對照組成活率(13/80)16.25%(P0.01)。3.手術移植接種成瘤小鼠平均生存天數(shù)25.86d,A組平均成瘤時間13.37d,B組平均成瘤時間12.33d,C組平均成瘤時間15.66d,D組平均成瘤時間14.25d。本研究結果表明:纖維蛋白凝膠移植成瘤組織病理特征符合腫瘤學動物模型需求。對BALB/c小鼠采用纖維蛋白凝膠粘合法移植接種經(jīng)三次皮下傳代培養(yǎng)的CT26細胞懸液可建立穩(wěn)定、經(jīng)濟、高效的結直腸癌生殖器官移植腫瘤動物模型,本試驗建模方法可為該種疾病的研究提供參考。
【學位授予單位】：甘肅農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R-332;R735.34
【圖文】：

圖 2-1 鼠源結腸腺癌 CT26 體外培養(yǎng) 圖 2-2 傳代培養(yǎng)后細胞生理特征（HE×100）Fig.2-1 In vitro cultured CT26 cellsFig.2-2 Pathological characteristic of subcultured cells of implanted tumor(HE×100)3.4 細胞生長曲線從生長曲線圖 2-3 可以看出，兩個細胞前期生長速度無明顯差異，但后期傳代培養(yǎng)組的生長速率優(yōu)于于原代細胞株培養(yǎng)組。由公式算出傳代培養(yǎng)組 CT26 與原代細胞株培養(yǎng)組 CT26 細胞倍增時間分別為 31.5h 和 33.5h，同樣說明傳代培養(yǎng)組細胞的生長速率高于原代細胞株培養(yǎng)組細胞。

圖 2-1 鼠源結腸腺癌 CT26 體外培養(yǎng) 圖 2-2 傳代培養(yǎng)后細胞生理特征（HE×100）Fig.2-1 In vitro cultured CT26 cellsFig.2-2 Pathological characteristic of subcultured cells of implanted tumor(HE×100)3.4 細胞生長曲線從生長曲線圖 2-3 可以看出，兩個細胞前期生長速度無明顯差異，但后期傳代培養(yǎng)組的生長速率優(yōu)于于原代細胞株培養(yǎng)組。由公式算出傳代培養(yǎng)組 CT26 與原代細胞株培養(yǎng)組 CT26 細胞倍增時間分別為 31.5h 和 33.5h，同樣說明傳代培養(yǎng)組細胞的生長速率高于原代細胞株培養(yǎng)組細胞。

圖 2-3 試驗組和對比組細胞株生長曲線圖Fig.2-3 Growth curve of subcultured CT26 cells3.5 染色體核型檢查傳代培養(yǎng)組 CT26 細胞與原代組 CT26 細胞染色體均為近端著絲粒，呈短棒狀顯示為鼠源染色體。二者均呈異倍體核型，以擬四倍體為主。染色體范圍為 50 至130 條，眾數(shù)為 67 至 80。四倍體占 40%，超三倍體占 35%，亞三倍體占 10%，超二倍體占 5%。結果顯示該細胞具有惡性腫瘤細胞染色體的特點。

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