【摘要】：銅綠假單胞菌是在醫(yī)院引起感染的最常見病原菌之一。在免疫缺陷及囊胞性纖維癥患者中,銅綠假單胞菌定殖人體肺部會(huì)引起慢性炎癥,致使肺功能逐漸喪失,最終導(dǎo)致患者呼吸衰竭甚至死亡。與浮游生物相比,生物被膜中的細(xì)菌抗生素抗性明顯增加,抗免疫能力增強(qiáng)。細(xì)菌生物被膜形成的標(biāo)志是菌體被胞外基質(zhì)包圍,胞外基質(zhì)(EPS)由胞外多糖,脂肪酸,胞外DNA和蛋白質(zhì)等混合物組成,其中胞外多糖是EPS的主要成分。銅綠假單胞菌至少產(chǎn)生三種不同的胞外多糖:藻酸鹽,Pel和Psl,這三種多糖決定著生物被膜結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性,在生物膜發(fā)展過程中發(fā)揮著不同的作用。本研究利用細(xì)菌顯微追蹤技術(shù)在單細(xì)胞水平上研究了胞外多糖水解酶PslG與PelA對(duì)細(xì)菌運(yùn)動(dòng)及其生物被膜的影響。PslG是Psl合成過程中的周質(zhì)蛋白。添加PslG后細(xì)菌運(yùn)動(dòng)明顯加快,運(yùn)動(dòng)速度提高到原來4-5倍,運(yùn)動(dòng)范圍擴(kuò)大,細(xì)菌處于無限制狀態(tài);細(xì)菌運(yùn)動(dòng)無明確方向,軌跡曲折,軌跡面積覆蓋效率提高;此外,細(xì)菌需要兩倍多的時(shí)間來形成生物被膜。關(guān)于Psl結(jié)構(gòu)及作用也已有一定的研究,但我們對(duì)Pel的結(jié)構(gòu)仍知之甚少,其具體功能還尚未明確。我們發(fā)現(xiàn)了PelA對(duì)銅綠假單胞菌細(xì)菌表面運(yùn)動(dòng)特性以及生物被膜形成的具體作用,我們觀察到PelA在單細(xì)胞水平上對(duì)銅綠假單胞菌初期粘附的表面運(yùn)動(dòng)也有著一定的影響,對(duì)生物膜的形成有一定的抑制作用;在形成生物被膜后期添加PelA,出現(xiàn)較明顯的生物被膜降解現(xiàn)象。同時(shí),為了達(dá)到更好的生物被膜降解效果,我們同時(shí)添加PslG、PelA,明顯看到已經(jīng)形成生物被膜的解離現(xiàn)象,這個(gè)現(xiàn)象可看做生物被膜形成的逆過程。多個(gè)因素共同作用可以達(dá)到更好的抑制生物被膜的效果。
【圖文】：

通過自身分泌的胞外多糖、蛋白和胞外 DNA其中而形成大量膜樣聚集體，我們稱之為生物被膜（Bio界中存在廣泛，且存在形式多種多樣，附著在固體表面則聚集在氣液界面則形成液體生物被膜。文虎克在牙菌斑中用自制的顯微鏡觀察到大量微生物的存次發(fā)現(xiàn)。隨后，在過去的 300 多年里，受限于當(dāng)時(shí)的科技水被膜進(jìn)行更微觀的細(xì)致觀察，且人們對(duì)生物被膜的認(rèn)知不到生物被膜是細(xì)菌在自然界中的普遍存在方式，所以微生征的研究很集中，而關(guān)于生物被膜的文獻(xiàn)報(bào)道卻很少。2技術(shù)進(jìn)步，科學(xué)家們逐漸發(fā)現(xiàn)自然界的細(xì)菌大部分都是以生，，并且生物被膜在人類社會(huì)有著重要的作用[1; 2]，從此越來行生物被膜的研究（圖 1-1），生物被膜這一名詞也逐漸進(jìn)

圖 1-2 生物被膜的發(fā)展階段以及在各個(gè)階段發(fā)揮作用的因e stage of biofilm development and the factors that play the ro膜的研究現(xiàn)狀
【學(xué)位授予單位】：天津大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R378

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7 胡丹丹;紫檀

本文編號(hào)：2629627