【摘要】：誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞,具有廣泛的應(yīng)用前景,特別是在藥物篩選,體外疾病模型和干細(xì)胞替代治療方面給人們帶來(lái)了無(wú)限的希望。但是,誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞在真正應(yīng)用于臨床治療前,其安全性是一個(gè)不得不考慮的問(wèn)題。 誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞的體外培養(yǎng)過(guò)程即是一個(gè)潛在的安全隱患。我們利用細(xì)胞遺傳學(xué)手段從染色體水平上對(duì)傳代培養(yǎng)過(guò)程中的小鼠誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞的基因組穩(wěn)定性進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果表明傳代培養(yǎng)的小鼠誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞中存在著染色體不穩(wěn)定現(xiàn)象:傳代培養(yǎng)中染色體數(shù)目異常細(xì)胞高比例出現(xiàn);四因子Oct4、Sox2、Klf4和cMyc誘導(dǎo)的小鼠誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞中含羅伯遜易位染色體細(xì)胞比例不斷增加。并利用胞質(zhì)阻斷法對(duì)小鼠誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞傳代培養(yǎng)過(guò)程中染色體異常的產(chǎn)生和積累機(jī)制進(jìn)一步研究。我們的結(jié)果證實(shí)小鼠誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞在傳代培養(yǎng)過(guò)程中染色體異常是不斷產(chǎn)生的。染色體不分離的發(fā)生導(dǎo)致14號(hào)染色體數(shù)目異常細(xì)胞高比例出現(xiàn);染色體易位的發(fā)生導(dǎo)致含14號(hào)染色體羅伯遜易位細(xì)胞比例不斷增加。 我們的研究結(jié)果提示改善現(xiàn)有的誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞的體外培養(yǎng)條件是十分必要的,這是誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞安全應(yīng)用于臨床治療的前提。
【圖文】：

圖 1.2 iPSCs 的多能性鑒定形態(tài)上，，iPSCs必須與ES細(xì)胞接近，而且具有無(wú)限增殖的能力。分子水平上，關(guān)鍵多能性因子的蛋白水平檢測(cè)：如Oct4，Nanog；E異的表便抗原的檢測(cè)：如小鼠中SSEA-1，人中的SSEA-3/4，TRa-1-60能性端粒酶表達(dá)的檢測(cè)。逆轉(zhuǎn)錄病毒成膜相關(guān)基因表達(dá)的檢測(cè)：如新生移酶和Trim28((Lei et al., 1996; Wolf and Goff, 2007)。 同時(shí)，真正的iPSC重編程因子發(fā)生沉默，不表達(dá)。而且，iPSCs的表觀遺傳譜也應(yīng)與ES細(xì)，如多潛能性基因啟動(dòng)子區(qū)域的甲基化程度，雌性細(xì)胞中X染色體的aherali et al., 2007; Rideout et al., 2001)。功能上，iPSCs必須具有分化成三胚層的能力，包括體外分化實(shí)驗(yàn)，畸成實(shí)驗(yàn)和嵌合體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)以及四倍體補(bǔ)償實(shí)驗(yàn)(Jaenischand Young, 2008).1.4 iPSCs 重編程分子機(jī)制Oct3/4， Sox2， Nanog和Klf4家族等轉(zhuǎn)錄因子網(wǎng)絡(luò)的嚴(yán)格調(diào)控對(duì)維持

也有數(shù)目和結(jié)構(gòu)異常同時(shí)出現(xiàn)的情況。有絲分裂過(guò)程出現(xiàn)異常，如細(xì)胞質(zhì)不分裂，中心體異常擴(kuò)增，DNA修復(fù)出錯(cuò)都可能導(dǎo)致異常染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)的核型出現(xiàn)（圖1.3）。另外，還有其他特異類型的染色體結(jié)構(gòu)異常，如：雙微體（DMs），多中心粒染色體，環(huán)狀染色體等。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R329

【共引文獻(xiàn)】

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1 周榮生;叢林;;國(guó)產(chǎn)探針在熒光原位雜交FISH檢測(cè)未培養(yǎng)羊水細(xì)胞性染色體中的應(yīng)用[J];安徽醫(yī)學(xué);2010年01期

2 謝鷺,周文,許亮國(guó),楊旭宇,姚開(kāi)泰;間期FISH在鼻咽癌細(xì)胞系及石臘切片中的應(yīng)用初探[J];癌癥;1999年04期

3 周俊,翁立紅,張顏明,顧文祥;應(yīng)用原位雜交和細(xì)胞遺傳學(xué)方法檢測(cè)淋巴瘤患者的染色體畸變[J];癌癥;2000年06期

4 周俊,翁立紅,顧文祥;原位雜交技術(shù)在檢測(cè)染色體畸變中的研究[J];中國(guó)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志;2000年01期

5 胡杰英;呂曉東;;細(xì)胞遺傳學(xué)和分子生物學(xué)檢測(cè)在慢性粒細(xì)胞白血病中的應(yīng)用[J];河南醫(yī)學(xué)研究;2007年02期

6 朱珊珊;凌奕;許琳;麥揚(yáng)青;王梅紅;陳雪銀;黃元華;黎明紅;;國(guó)產(chǎn)熒光原位雜交探針在產(chǎn)前染色體異常診斷中的應(yīng)用研究[J];海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2009年09期

7 徐兩蒲;黃海龍;林元;彭淑華;何德欽;李英;林娜;劉合q;;熒光原位雜交技術(shù)在產(chǎn)前診斷染色體疾病中的應(yīng)用[J];海峽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2010年02期

8 余世容,劉艷秋,李宇中,羅堅(jiān)真,馬水清;雙色FISH檢測(cè)未培養(yǎng)羊水及培養(yǎng)的外周血染色體標(biāo)本方法的研究[J];江西醫(yī)藥;2004年02期

9 劉慈;尹紅亞;劉學(xué)軍;辛虹;;熒光原位雜交技術(shù)快速產(chǎn)前診斷胎兒常見(jiàn)染色體非整倍體異常研究[J];中國(guó)全科醫(yī)學(xué);2010年35期

10 李豐;金潤(rùn)銘;;分子細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)在染色體病診斷中的應(yīng)用[J];實(shí)用兒科臨床雜志;2006年08期

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4 趙麗;FISH技術(shù)在遺傳病診斷及產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用[D];蘇州大學(xué);2004年

5 王強(qiáng);家蠶染色體的核型模式及Bmrbp1的FISH研究[D];西南大學(xué);2006年

6 粘偉紅;FISH技術(shù)驗(yàn)證毛冠鹿Y染色體及核型多態(tài)機(jī)理初步研究[D];南京師范大學(xué);2006年

7 李豐;引物原位標(biāo)記在染色體病診斷中的應(yīng)用[D];華中科技大學(xué);2006年

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本文編號(hào)：2579267