【摘要】：目的:通過觀察川芎嗪對順鉑耳毒性作用的拮抗作用,及對Bax、Bcl-2 mRNA及蛋白表達水平的影響,探討川芎嗪拮抗順鉑耳毒性作用的部分機制。方法:40只豚鼠隨機分為空白組(B)和模型組(M),每組20只,對M組豚鼠進行耳聾模型復制,模型復制成功后,將B組及M組進行第2次隨機分組,各自再次隨機分為兩組,分別為:空白對照組(B1)、空白+川芎嗪組(B2)、模型對照組(M1)、模型+川芎嗪(M2),B2及M2組豚鼠均經腹腔注射川芎嗪注射液,劑量為140 mg/kg,每日1次,連續(xù)2周。B1及M1組豚鼠經腹腔注射等量生理鹽水,每日1次,連續(xù)2周。末次給藥后1 h,處死豚鼠,采用熒光定量PCR法對各組豚鼠耳蝸組織中Bax、Bcl-2 mRNA表達水平進行檢測;采用western-blot法對各組豚鼠耳蝸組織中Bax、Bcl-2蛋白表達水平進行檢測。結果:模型評價,空白組和模型組豚鼠ABR閾值具有顯著性差異(P0.0001);模型組豚鼠耳蝸毛細胞變形明顯,排列不均,溶解破壞的毛細胞較多�？瞻讓φ战M和空白+川芎嗪組豚鼠耳蝸毛細胞偶見凋亡陽性細胞,而模型對照組毛細胞凋亡數(shù)量最多,可見大量陽性細胞出現(xiàn),與空白對照組和空白+川芎嗪組比較,有顯著性差異(P0.001);與模型對照組比較,模型+川芎嗪組豚鼠耳蝸毛細胞凋亡數(shù)量明顯減少,兩者比較,有統(tǒng)計學差異(P0.05)。與空白對照組和空白+川芎嗪組比較,模型對照組豚鼠耳蝸組織中Bax mRNA及蛋白表達水平顯著升高(P0.001),而Bcl-2 mRNA及蛋白表達水平顯著降低(P0.001);與模型對照組比較,模型+川芎嗪組豚鼠耳蝸組織中Bax mRNA及蛋白表達水平顯著降低(P0.01),而Bcl-2 mRNA及蛋白表達水平顯著升高(P0.05)。結論:順鉑具有誘導豚鼠耳蝸毛細胞凋亡的耳毒性作用,其作用機制與順鉑能夠影響B(tài)ax、Bcl-2 mRNA及蛋白表達相關,而川芎嗪能夠很好的拮抗順鉑這一作用。
【圖文】：

，測定目的條帶和內參條帶灰度值，以目的條帶灰度值/內參條帶灰度值的比值作為該樣本目的蛋白表達的相對水平進行統(tǒng)計分析。1．5統(tǒng)計學方法采用SPSS16．0統(tǒng)計軟件對各組數(shù)據進行統(tǒng)計分析，其中ABＲ反應閾值、Bax、Bcl－2mＲNA及蛋白表達的相對水平等計量資料均采用“s藊±s”表示，其中ABＲ反應閾值采用t檢驗，Bax、Bcl－2mＲNA及蛋白表達水平采用單因素方差分析，以P＜0.05被認為有顯著性統(tǒng)計學差異。2結果2．1ABＲ閾值空白組和模型組豚鼠ABＲ閾值統(tǒng)計結果顯示，兩組間比價，具有顯著性差異(P＜0.0001)。詳見圖1。圖1模型評價ABＲ閾值柱形圖2．2耳蝸毛細胞形態(tài)耳蝸基底膜鋪片鏡下顯示，空白組豚鼠耳蝸毛細胞呈鋪路石樣均勻分布，排列整齊，圖2黑色箭頭所示，未見細胞缺失;模型組豚鼠耳蝸毛細胞變形明顯，排列不均，溶解破壞的毛細胞較多，圖3紅色箭頭所示。詳見插頁ⅩⅥ圖2～圖3。2．3耳蝸組織中Bax、Bcl－2mＲNA表達水平各組豚鼠耳蝸組織中Bax、Bcl－2mＲNA表達水平結果顯示，與空白對照組和空白+川芎嗪組比較，模型對照組豚鼠耳蝸組織中BaxmＲNA表達水平顯著升高(P＜0.001)，而Bcl－2mＲNA表達水平顯著降低(P＜0.001);與模型對照組比較，模型+川芎嗪組豚鼠耳蝸組織中BaxmＲNA表達水平顯著降低(P＜0.01)，而Bcl－2mＲNA表達水平顯著升高(P＜0.05)。詳見圖4，插頁ⅩⅥ圖5～圖6，圖7，插頁ⅩⅥ圖8～圖9。圖4耳蝸組織中BaxmＲNA表達柱形圖圖7耳蝸組織中Bcl－2mＲNA表達柱形圖2．4耳蝸組織中Bax、Bcl－2蛋白表達水平各組豚鼠耳蝸組織中Bax、Bcl－2蛋白表達水平結果顯示，與空白對照組和空白+川芎嗪組比較，模型對照組豚鼠耳蝸組織中Bax蛋白表達水平顯著升高(P＜0.001)，而Bcl－2蛋白表達水平顯著降低(P＜0.001);與模型

，圖2黑色箭頭所示，未見細胞缺失;模型組豚鼠耳蝸毛細胞變形明顯，排列不均，溶解破壞的毛細胞較多，圖3紅色箭頭所示。詳見插頁ⅩⅥ圖2～圖3。2．3耳蝸組織中Bax、Bcl－2mＲNA表達水平各組豚鼠耳蝸組織中Bax、Bcl－2mＲNA表達水平結果顯示，與空白對照組和空白+川芎嗪組比較，，模型對照組豚鼠耳蝸組織中BaxmＲNA表達水平顯著升高(P＜0.001)，而Bcl－2mＲNA表達水平顯著降低(P＜0.001);與模型對照組比較，模型+川芎嗪組豚鼠耳蝸組織中BaxmＲNA表達水平顯著降低(P＜0.01)，而Bcl－2mＲNA表達水平顯著升高(P＜0.05)。詳見圖4，插頁ⅩⅥ圖5～圖6，圖7，插頁ⅩⅥ圖8～圖9。圖4耳蝸組織中BaxmＲNA表達柱形圖圖7耳蝸組織中Bcl－2mＲNA表達柱形圖2．4耳蝸組織中Bax、Bcl－2蛋白表達水平各組豚鼠耳蝸組織中Bax、Bcl－2蛋白表達水平結果顯示，與空白對照組和空白+川芎嗪組比較，模型對照組豚鼠耳蝸組織中Bax蛋白表達水平顯著升高(P＜0.001)，而Bcl－2蛋白表達水平顯著降低(P＜0.001);與模型對照組比較，模型+川芎嗪組豚鼠耳蝸組織中Bax蛋白表達水平顯著降低(P＜0.05)，而Bcl－2蛋白表達水平顯著升高(P＜0.05)。詳見圖10～圖13。圖10耳蝸組織中Bax表達柱形圖1829
【作者單位】： 遼寧中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院;遼寧中醫(yī)藥大學;遼寧省腫瘤醫(yī)院;
【基金】：遼寧省自然科學基金項目(2013020190)
【分類號】：R285.5;R-332

【參考文獻】

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【二級參考文獻】

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本文編號：2539051