【摘要】：盡管人們對于精神疾病的治療與預防做出了多方面的努力與探索,包括采用各種心理認知療法和物理治療,但藥物治療仍是當前最重要的治療手段。越來越多的研究者認識到,在尋找更好的治療藥物時應該重點考慮以下方面:理解疾病的病因學基礎、闡明現(xiàn)有藥物的作用機制及尋找新靶點與新概念。毫無疑問,疾病的動物模型對于理解這幾點有著不可替代的重要意義。 抑郁癥是一種以持續(xù)性心境低落為主要特征的精神系統(tǒng)疾病,其終身患病率達15-20%,是發(fā)病率最高的精神疾病。根據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)的預測,在2020年抑郁癥將位列全球第二大疾病負擔。而軍人群體接觸的強烈應激源遠遠高于普通民眾,由于在戰(zhàn)爭、反恐行動及其他非軍事災難性突發(fā)事件中遭受強烈應激及神經(jīng)性毒劑的小規(guī)模暴露,導致以抑郁癥為主的多種軍事相關精神障礙在軍人群體極為常見。鑒于模擬戰(zhàn)場環(huán)境中化學武器損傷導致精神障礙的動物模型缺乏,本課題擬建立符合神經(jīng)性毒劑致抑郁的動物模型,為研發(fā)高效、安全的化學武器致精神障礙的救治藥物提供有效研發(fā)平臺。 神經(jīng)性毒劑是從民用有機磷殺蟲劑發(fā)展而來,毒死蜱(Chlorpyrifos,CPF)是最引起學者關注的有機磷殺蟲劑之一,最早是在第二次世界大戰(zhàn)的德國作為神經(jīng)性毒氣研發(fā)使用,被特異設計作用于神經(jīng)系統(tǒng)。隨后,由于其廣譜、高效、低殘留的特點,被廣泛用于農業(yè)、家庭及環(huán)境衛(wèi)生領域。流行病學研究表明,慢性低劑量接觸毒死蜱有潛在的致情感性精神障礙危險,經(jīng)常接觸毒死蜱的人群易出現(xiàn)以抑郁焦慮為主的精神障礙。事實上,毒死蜱在食物及飲用水中的廣泛殘留及蓄積,使得普通人群特別是兒童、青少年易受到其致抑郁焦慮等情感性精神障礙的潛在危害。這一流行病學證據(jù)為我們使用毒死蜱誘導大鼠抑郁模型提供了立論依據(jù),因此,我們希望通過反復給予低劑量毒死蜱在大鼠上誘導出和人類抑郁癥近似的表現(xiàn),以此模擬神經(jīng)性毒劑或環(huán)境內分泌干擾物的小劑量暴露,建立化學藥物誘導致抑郁的動物模型。 本研究主要從表觀效度、結構效度及預測效度這三個常用來評價動物模型有效性的指標來評價毒死蜱誘導的大鼠抑郁模型。表觀效度評價發(fā)現(xiàn),反復接觸低劑量毒死蜱后,大鼠在多個評價模型上誘導出抑郁樣行為特性,表現(xiàn)為強迫游泳不動時間顯著延長,新奇-抑制攝食實驗攝食潛伏期增加,巧克力牛奶實驗中表現(xiàn)出快感缺失樣行為,獲得性無助實驗中逃避失敗次數(shù)顯著增加,但自發(fā)活動實驗中水平運動與垂直運動無明顯影響。我們通過反復接觸低劑量毒死蜱成功誘導出類似于慢性應激大鼠的抑郁樣行為表型。因此,認為該模型符合抑郁癥動物模型建立所要求的表觀效度。 在結構效度評價,結合多個抑郁癥發(fā)病相關的病因學假說來研究毒死蜱接觸誘導抑郁行為的生物學機制: ⑴抑郁癥的“單胺假說”:采用高效液相-電化學檢測法對不同腦區(qū)單胺類神經(jīng)遞質及其代謝產(chǎn)物進行了檢測,發(fā)現(xiàn)反復接觸毒死蜱能顯著影響單胺神經(jīng)遞質:降低海馬5-HT及5-HIAA水平,降低前額葉皮層NE及5-HT水平并升高5-HIAA水平,升高紋狀體NE、DA、DOPAC及5-HIAA水平。此外,我們在多個腦區(qū)發(fā)現(xiàn)毒死蜱引起MAO-A及MAO-B活性的輕微升高可能是其引起單胺類神經(jīng)遞質水平變化的原因之一。 ⑵抑郁癥的“細胞因子假說”:采用酶聯(lián)免疫吸附實驗檢測多個腦區(qū)細胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6及IL-4)水平,發(fā)現(xiàn)反復接觸毒死蜱對不同腦區(qū)細胞因子水平有著不同方向的影響,表現(xiàn)為海馬前炎性因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)釋放增加、抗炎因子(IL-4)釋放降低,與抑郁癥發(fā)病表現(xiàn)一致;而紋狀體TNF-α、IL-1β、IL-6釋放降低,前額葉皮層TNF-α、IL-1β釋放降低而IL-6水平略微增加,提示腦區(qū)差異性和(或)大腦皮質-紋狀體-邊緣系統(tǒng)神經(jīng)環(huán)路可能在抑郁癥病理進程中發(fā)揮作用。 ⑶抑郁癥的“HPA軸功能紊亂假說”:采用酶聯(lián)免疫吸附實驗檢測血清中三種HPA軸相關激素,發(fā)現(xiàn)ACTH及CORT水平顯著增加,提示HPA軸功能亢進可能參與了毒死蜱誘導的抑郁樣表現(xiàn)。 ⑷抑郁癥的“Wnt通路假說”:采用蛋白免疫印跡實驗檢測不同腦區(qū)Wnt通路上下游信號分子Wnt2、β-catenin、激酶GSK-3β及其磷酸化蛋白水平。結果未發(fā)現(xiàn)上下游的Wnt2及β-catenin水平及其磷酸化水平的變化,但發(fā)現(xiàn)毒死蜱引起GSK-3β磷酸化水平的顯著升高,而該酶的磷酸化與包括抑郁癥、神經(jīng)退行性疾病在內的多種神經(jīng)精神障礙的病理生理機制密切相關。結合該酶存在廣泛底物,我們推測該酶參與到抑郁癥發(fā)病機制可能并非通過Wnt通路。 此外,我們通過測定多個腦區(qū)的AChE活性,發(fā)現(xiàn)給予較低劑量毒死蜱引起的乙酰膽堿變化均低于文獻報道能引起全身系統(tǒng)性膽堿能毒性的閾值70%,提示在我們所選用的毒死蜱劑量下,并不引起明顯的膽堿能毒性表現(xiàn)。 綜合上述結構效度評價結果,我們通過反復接觸較低劑量毒死蜱成功誘導出與臨床抑郁癥類似的神經(jīng)生化變化,符合多個抑郁癥的病因學假說,因此認為該模型符合抑郁癥動物模型的結構效度。 在預測效度評價中,我們觀察到兩種分別針對去甲腎上腺素能及5-羥色胺能的抗抑郁藥去甲丙咪嗪、氟西汀能有效逆轉毒死蜱誘導引起的抑郁樣行為表現(xiàn),提示我們所建立的模型對慢性給予抗抑郁藥敏感,該模型符合模型建立的預測效度。 結論:通過反復接觸較低劑量毒死蜱我們成功誘導出大鼠抑郁樣行為表型,模型大鼠具有抑郁癥的病理生理特征,并且其抑郁樣行為可被抗抑郁藥物逆轉。因此,該模型在表觀效度、結構效度及預測效度上均較好地符合了抑郁模型的特征,表明其具有成為新型抑郁動物模型的潛在可能性。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2011
【分類號】：R-332

【共引文獻】

相關期刊論文 前10條

1 趙靜;唐欣昀;花日茂;王道勝;;馬拉硫磷的應用及其降解研究進展[J];安徽農學通報(上半月刊);2011年11期

2 陶玉貴;王其進;黃曉東;谷浩;倪正;;膠束電動毛細管色譜法測定水中的毒死蜱含量[J];環(huán)境化學;2011年10期

3 ;Biodegradation of malathion by Acinetobacter johnsonii MA19 and optimization of cometabolism substrates[J];Journal of Environmental Sciences;2009年01期

4 夏秋媛;李芳秋;;有機磷殺蟲劑的免疫毒性及其機制的研究進展[J];醫(yī)學研究生學報;2009年01期

5 陶玉貴;顏世雷;潘軍;汪耀明;;氧化樂果降解真菌的篩選及其特性研究[J];農業(yè)環(huán)境科學學報;2007年05期

6 梁俊;趙政陽;李海飛;郭碧云;;蘋果中毒死蜱殘留降解動態(tài)研究[J];農業(yè)環(huán)境科學學報;2008年06期

7 陶玉貴;王其進;谷浩;倪正;秦昌云;;哈夫尼菌降解毒死蜱條件的優(yōu)化及動力學模型建立[J];農業(yè)環(huán)境科學學報;2011年03期

8 崔旭;趙靜;吳加倫;聞玉田;;48%毒死蜱乳油在杭白菊和土壤中的消解動態(tài)[J];農藥學學報;2014年02期

9 陸嫻婷;趙美蓉;劉維屏;;農藥的免疫毒性研究[J];生態(tài)毒理學報;2007年01期

10 左曉娜;肖炳坤;劉妍如;楊建云;甄蓓;黃榮清;;山梔茶水提物和醇提物的抗抑郁作用研究[J];時珍國醫(yī)國藥;2013年03期

相關博士學位論文 前10條

1 于貞;三種海洋濾食動物對有機磷農藥的反應及降解[D];大連理工大學;2011年

2 高寧寧;多壁碳納米管的表面化學修飾調節(jié)其免疫毒性的機理研究[D];山東大學;2011年

3 張穎;典型擬除蟲菊酯類農藥潛在毒性的整合評價研究[D];浙江大學;2011年

4 孫英;北京地區(qū)地表水環(huán)境激素污染現(xiàn)狀與環(huán)境風險性評價[D];中國農業(yè)大學;2004年

5 伊雄海;農藥類環(huán)境激素低劑量暴露對鯽魚內分泌干擾效應及生物標志物研究[D];上海交通大學;2008年

6 郭子武;筍用竹林地有機農藥污染土壤微生物修復機理研究[D];中國林業(yè)科學研究院;2008年

7 嚴家川;煙堿對AD大鼠認知功能障礙的作用及機制的研究[D];第三軍醫(yī)大學;2006年

8 朱虹;雌激素協(xié)同因子的抗抑郁效應及其作用機制[D];中國科學技術大學;2008年

9 檀德宏;膽堿酯酶抑制劑類農藥的神經(jīng)毒性及機制研究[D];沈陽藥科大學;2009年

10 趙杰宏;有機磷水解酶基因OPD轉化番茄、黃瓜降解農藥殘留的研究[D];貴州大學;2009年

相關碩士學位論文 前10條

1 史延華;毒死蜱降解菌的分離、鑒定及其降解特性[D];中國農業(yè)科學院;2011年

2 龔瑜;孕前慢性溫和應激對子代小鼠神經(jīng)行為發(fā)育影響的研究[D];南京醫(yī)科大學;2011年

3 王其進;生物催化/光催化聯(lián)合降解毒死蜱的研究[D];安徽工程大學;2011年

4 焦利飛;有機磷農藥毒死蜱低劑量重復染毒致雄性大鼠生殖毒性及其作用機制研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2011年

5 解秀平;有機磷降解菌的分離、降解性能及系統(tǒng)發(fā)育研究[D];山東農業(yè)大學;2006年

6 任彤彤;農藥對河北某棉區(qū)男性精液質量和精子DNA損傷作用的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2006年

7 劉喜平;氯氰菊酯免疫毒性機制的初步研究[D];華中師范大學;2007年

8 趙楠;棉籽總黃酮抗抑郁作用及可能機制的研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2007年

9 李暉;辛基酚、壬基酚對雌性大鼠的毒性作用及葛根黃酮干預作用的研究[D];新疆醫(yī)科大學;2008年

10 郭紅軍;池蝶蚌與三角帆蚌抗菌酶活性及免疫相關基因表達特性的研究[D];南昌大學;2008年

，

本文編號：2462342