【摘要】：目的:探討卡介苗(BCG)與ESAT-6激活的人外周血γδT細(xì)胞是否具有抗原提呈細(xì)胞的表型和功能。方法:用Ficoll密度梯度離心法分離人外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)后,經(jīng)尼龍毛柱法分離獲得T細(xì)胞。將T細(xì)胞分別用卡介苗與ESAT-6刺激擴(kuò)增γδT細(xì)胞后用流式細(xì)胞儀分選純化γδT細(xì)胞,并檢測(cè)其抗原提呈細(xì)胞表型。PBMC用貼壁法制備單核細(xì)胞后,誘導(dǎo)培養(yǎng)分化為成熟DC細(xì)胞,用流式細(xì)胞儀檢測(cè)其成熟程度。T細(xì)胞用CFSE標(biāo)記后分別按四種方法培養(yǎng):①與結(jié)核分枝桿菌分泌性抗原(Mtb-Sag)共同培養(yǎng);②與Mtb-Sag孵育2小時(shí)后的卡介苗激活的γδT細(xì)胞共同培養(yǎng);③與Mtb-Sag孵育2小時(shí)后的ESAT-6激活的γδT細(xì)胞共同培養(yǎng);④與Mtb-Sag孵育2小時(shí)后的成熟DC細(xì)胞共同培養(yǎng);培養(yǎng)后檢測(cè)T細(xì)胞及CD4+T細(xì)胞的增殖情況。結(jié)果:卡介苗與ESAT-6激活的γδT細(xì)胞CD80、CD86、HLA-DR的表達(dá)水平都增加,且后者顯著高于前者。卡介苗與ESAT-6激活的γδT細(xì)胞培養(yǎng)組的T細(xì)胞增殖總數(shù)及CD4+T細(xì)胞的增殖有所增加;而后者顯著高于前者,與成熟DC細(xì)胞培養(yǎng)組的增殖情況相似。結(jié)論:用卡介苗與ESAT-6激活的人外周血γδT細(xì)胞都具有抗原提呈細(xì)胞的表型和抗原提呈作用;但后者顯著高于前者。
[Abstract]:Aim: to investigate the phenotype and function of antigen presenting cells in human peripheral blood 緯 未 T cells activated by BCG (BCG) and ESAT-6. Methods: human peripheral blood mononuclear cells (PBMC) were isolated by Ficoll density gradient centrifugation and T cells were isolated by nylon hair column method. 緯 未 T cells were isolated and purified by flow cytometry after stimulated by BCG and ESAT-6 respectively, and their phenotypes of antigen presenting cells were detected. After monocytes were prepared by adherent method, the cells were induced to differentiate into mature DC cells, and the differentiation of 緯 未 T cells into mature 緯 未 T cells was observed by flow cytometry, and the differentiation of 緯 未 T cells into mature PBMCs was observed. The mature degree of T cells was detected by flow cytometry. The T cells were cultured in four ways: 1) co-culture with Mycobacterium tuberculosis secretory antigen (Mtb-Sag); (2) 緯 未 T cells activated by BCG were co-cultured with Mtb-Sag for 2 hours, 緯 未 T cells activated by ESAT-6 were co-cultured with Mtb-Sag for 2 hours, and mature DC cells were incubated with Mtb-Sag for 2 hours. The proliferation of T cells and CD4 T cells was detected after culture. Results: both BCG and ESAT-6-activated 緯 未 T cells increased the expression of CD80,CD86,HLA-DR, and the latter was significantly higher than that of the former. The total proliferation of T cells and the proliferation of CD4 T cells were increased in BCG and ESAT-6 activated 緯 未 T cell culture groups, while the proliferation of CD4 T cells in the latter group was significantly higher than that in the mature DC cell culture group, which was similar to that of mature BCG T cell culture group. Conclusion: both BCG-activated 緯 未 T cells and ESAT-6-activated human peripheral blood 緯 未 T cells have the phenotypic and antigen presenting effects of antigen presenting cells, but the latter is significantly higher than the former.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院呼吸內(nèi)科;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.30872261)
【分類號(hào)】：R392

【參考文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2431079