【摘要】：目的：探討利用Ⅶ型膠原酶制作大鼠腦出血模型，使之成為一種穩(wěn)定有效，可重復的腦出血模型方法。 方法：雄性SD大鼠48只隨機分為實驗組和對照組，將等體積Ⅶ型膠原酶和無菌生理鹽水分別注入實驗組和對照組大鼠尾殼核。通過觀察兩組大鼠在第1、3和7天不同時間點的神經功能缺損變化，最后處死后腦部尾殼核形成的血腫體積大小以及腦組織化學改變。 結果：實驗組大鼠都有神經功能缺損明顯，尾殼核有明顯出血灶，而對照組神經體征不明顯，尾殼核未見明顯出血，兩組相比較具有明顯統(tǒng)計學意義（p＜0.05）。同樣，切片HE染色中可見穿刺道大量紅細胞存在，血腫周圍細胞水腫明顯。而對照組僅見穿刺針道有少許血細胞存在。 結論：Ⅶ型膠原酶制作大鼠腦出血模型是一種成功的穩(wěn)定的可重復的方法。 目的：探討外源性NGF對大鼠腦出血的作用機制。 方法：將SD大鼠隨機分成三組，即假手術組、對照組和NGF組。對照組和NGF組均按第一部分造模方法所述以Ⅶ型膠原酶制備腦出血模型，假手術組只將給予頭皮切開，不做任何處理便縫合皮膚。NGF組是經孔給予2μl混有300uNGF的生理鹽水緩慢注入，對照組則給予2μl無菌生理鹽水，，假手術組不給予NGF或無菌生理鹽水。術畢觀察三組大鼠神經功能缺損變化，按第1、3和7天三個時間點處死大鼠，處死前給予BrdU抗體按50mg/kg行腹腔注射，4%多聚甲醛前固定鼠腦，取出腦組織后再以4%多聚甲醛后固定，20%和30%蔗糖液脫水，錫紙包裹后凍存于-80℃冰箱中。再做10μm厚的冰凍切片，將冰凍切片行免疫組化檢測，在光學顯微鏡下計數(shù)新生神經元細胞（Nestin抗體標記）數(shù)目、新生血管數(shù)目（VEGF抗體標記）以及含BrdU的增殖神經元的數(shù)目，最后將各組數(shù)據(jù)性統(tǒng)計學分析。 結果：假手術組神經功能缺損評分前后均為0分；對照組造模后有明顯神經功能缺損，但后期神經功能恢復緩慢；NGF組在給予NGF后神經功能缺損評分有改善，第7天時間點改善最明顯，統(tǒng)計學分析有意義（P＜0.05）。將實驗組與對照組及假手術組比較，經免疫組化染色檢測，實驗組Nestin抗體標記和VEGF抗體標記陽性細胞均增多，有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。 結論：通過本實驗結果說明外源性NGF能激活腦出血模型大鼠的內源性神經干細胞（NSCs），并促進其增殖分化為神經神經細胞。同時能促進顱內神經細胞分泌VEGF，而免疫組化檢測進一步說明NGF從細胞水平促進了腦出血大鼠的神經功能的恢復。
[Abstract]:Objective: to explore a stable, effective and repeatable method for making intracerebral hemorrhage model in rats using collagenase 鈪

本文編號：2425071