【摘要】：目的探索人胎腦神經干細胞的體外分離培養(yǎng)條件,從而在體外大量增殖神經干細胞,并觀察神經干細胞增殖和分化的特點。方法采用含堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)和表皮細胞生長因子(EGF)的無血清培養(yǎng)技術,從14周自愿水囊引產人胎腦海馬皮質中分離出神經干細胞,并進行培養(yǎng)、傳代、分化觀察,應用免疫熒光細胞化學技術對培養(yǎng)的細胞及其分化的細胞進行鑒定。結果從14周人胎腦皮質中成功分離出具有自我更新和多分化潛能的神經干細胞,在無血清培養(yǎng)時細胞呈懸浮狀態(tài)生長,形成神經球,該細胞具有連續(xù)增殖能力,可傳代培養(yǎng),表達神經巢蛋白抗原(Nestin);在含血清培養(yǎng)時誘導神經干細胞分化,分化后的細胞表達神經元細胞和膠質細胞的特異性抗原。結論在含有EGF和bFGF的無血清培養(yǎng)液中,從人胎腦能分離培養(yǎng)出具有自我復制和分化潛能的神經干細胞,并能在體外擴增,可進一步用于基礎及臨床研究。
[Abstract]:Objective to explore the conditions of isolation and culture of neural stem cells from human fetal brain in vitro, so as to proliferate neural stem cells in vitro and observe the characteristics of proliferation and differentiation of neural stem cells. Methods using serum-free culture technique containing basic fibroblast growth factor (bFGF) and epidermal growth factor (EGF), neural stem cells (NSCs) were isolated from the cortex of human fetal brain induced by 14 weeks of voluntary water sac, and were cultured and subcultured. The cultured cells and the differentiated cells were identified by immunofluorescence cytochemistry. Results the neural stem cells with self-renewal and multi-differentiation potential were successfully isolated from the human fetal cerebral cortex at the 14th week. The cells grew in suspension state and formed a neurosphere in serum-free culture. The cells had the ability of continuous proliferation and could be subcultured. Expression of nestin antigen (Nestin); The differentiation of neural stem cells was induced by serum-containing culture. The differentiated cells expressed specific antigens of neuronal cells and glial cells. Conclusion in serum-free medium containing EGF and bFGF, neural stem cells with self-replication and differentiation potential can be isolated from human fetal brain and can be amplified in vitro, which can be further used in basic and clinical research.
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學附屬安慶醫(yī)院神經外科;安慶師范學院生命科學系;
【分類號】：R329

【二級參考文獻】

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