【摘要】：為研究棕櫚�；瘜χ行粤＜�(xì)胞趨化性的調(diào)節(jié)作用,利用2-溴棕櫚酸(2-bromopalmitate,2-BP)或棕櫚酸(palmitate)預(yù)處理來源于骨髓的中性粒細(xì)胞.采用流式細(xì)胞術(shù)(flow cytometry,FCM)檢測中性粒細(xì)胞的存活率和中性粒細(xì)胞內(nèi)F-肌動蛋白(F-actin)的生成;通過免疫熒光分析中性粒細(xì)胞內(nèi)F-actin的極化;利用細(xì)胞遷移試驗(yàn)檢測中性粒細(xì)胞的遷移能力;通過免疫印跡的實(shí)驗(yàn)方法檢測蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)和磷酸化AKT的表達(dá).結(jié)果發(fā)現(xiàn),2-BP預(yù)處理顯著抑制了中性粒細(xì)胞內(nèi)F-actin極化,且抑制了中性粒細(xì)胞向趨化肽N-甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸(N-formylmethionyl-leucyl-phenylalanine,f MLP)遷移的能力,而棕櫚酸預(yù)處理顯著促進(jìn)了中性粒細(xì)胞內(nèi)F-肌動蛋白極化.兩者對F-actin生成和AKT的磷酸化均無影響.研究結(jié)果表明,2-BP處理可能通過影響F-actin的極化抑制了中性粒細(xì)胞向f MLP的趨化活性.
[Abstract]:In order to study the regulation of palmitoacylation on neutrophil chemotaxis, 2-bromopalmitate 2-BP (2-bromopalmitate 2-BP) or palmitic acid (palmitate) were pretreated from neutrophils from bone marrow. Flow cytometry (flow cytometry,FCM) was used to detect the survival rate of neutrophils and the production of F-actin (F-actin) in neutrophils, and the polarization of F-actin in neutrophils was analyzed by immunofluorescence. The translocation ability of neutrophils was detected by cell migration assay, and the expression of protein kinase (B (protein kinase) and phosphorylated AKT was detected by Western blotting. The results showed that 2-BP pretreatment significantly inhibited the F-actin polarization in neutrophils and the ability of neutrophils to migrate to N-formylmethionyl-leucyl-phenylalanine (MLP). Palmitic acid pretreatment significantly promoted F-actin polarization in neutrophils. Both of them had no effect on F-actin production and AKT phosphorylation. The results show that 2-BP treatment may inhibit the chemotaxis of neutrophils to f MLP by affecting the polarization of F-actin.
【作者單位】： 深圳大學(xué)醫(yī)學(xué)部中心實(shí)驗(yàn)室;聊城大學(xué)藥學(xué)院;上海市第十人民醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室;同濟(jì)大學(xué)醫(yī)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31401217) 中國博士后科學(xué)基金資助項(xiàng)目(2014M0560672) 深圳市科技基礎(chǔ)研究計(jì)劃資助項(xiàng)目(JCYJ20150403091443312)~~
【分類號】：R392

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本文編號：2346208