【摘要】：目的研究兩段重復的熱休克蛋白70(mHSP70)407-426序列(2mHSP70_(407-426),M_2)能否增強血管內皮生長因子(VEGF)融合蛋白疫苗抗腫瘤活性。方法以加端PCR方式,將M_2以柔性肽連接于hVEGF121突變體1的C末端,得到hVEGF121突變體2蛋白。用H22肝癌細胞構建荷瘤肝癌小鼠模型。24只小鼠按照體重隨機分為3組:模型組,實驗1組(hVEGF121突變體1蛋白80μg)及實驗2組(hVEGF121突變體2蛋白80μg)。以酶聯(lián)免疫吸附法檢測免疫小鼠血清中的抗體水平,以脾淋巴細胞增殖實驗檢測免疫小鼠細胞免疫應答水平,以皮內腫瘤血管模型考察蛋白疫苗抗血管生成活性。結果實驗1組與實驗2組的瘤重分別為(1.58±0.28),(1.17±0.25)g,與實驗1組比較,實驗2組差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。實驗1組與實驗2組的小鼠免疫血清中抗-VEGF抗體分別為0.54±0.09,0.74±0.1,與實驗1組比較,實驗2組小鼠免疫血清中檢測到更高滴度的抗-VEGF抗體,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)。實驗1組與實驗2組的刺激脾淋巴細胞的增殖活性分別為0.26±0.03,0.36±0.04,與實驗1組比較,實驗2組疫苗免疫能夠更有效地刺激脾淋巴細胞的增殖,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)。結論 M_2作為分子佐劑可以有效增強VEGF融合蛋白疫苗的抗腫瘤活性。
[Abstract]:Objective to investigate whether the double repeat heat shock protein 70 (mHSP70) 407-426 (2mHSP707-426) can enhance the antitumor activity of vascular endothelial growth factor (VEGF) fusion protein vaccine. Methods Mstu2 was ligated to the C-terminal of hVEGF121 mutant 1 by adding terminal PCR. The hVEGF121 mutant 2 protein was obtained. 24 mice were randomly divided into three groups according to their body weight: model group, experimental group 1 (hVEGF121 mutant 1 protein 80 渭 g) and experimental group 2 (hVEGF121 mutant 2 protein 80 渭 g). The level of antibody in serum of immunized mice was detected by enzyme-linked immunosorbent assay (Elisa), the cellular immune response of immunized mice was detected by spleen lymphocyte proliferation test, and the anti-angiogenic activity of protein vaccine was evaluated by intradermal tumor vascular model. Results the tumor weight of group 1 and group 2 were (1.58 鹵0.28), (, 1.17 鹵0.25) g, which was significantly higher than that of group 1 (P0.05). The anti-VEGF antibody in the immunized serum of experimental group 1 and experimental group 2 was 0.54 鹵0.09 and 0.74 鹵0.1, respectively. Compared with group 1, the titer of anti-VEGF antibody was detected in the immune serum of experimental group 2. The difference was statistically significant (P0.01). The proliferative activity of splenic lymphocytes in experimental group 1 and experimental group 2 was 0.26 鹵0.03 and 0.36 鹵0.04, respectively. Compared with experimental group 1, vaccine immunization of experimental group 2 was more effective in stimulating the proliferation of splenic lymphocytes. The difference was statistically significant (P0.01). Conclusion MK _ 2 as a molecular adjuvant can effectively enhance the anti-tumor activity of VEGF fusion protein vaccine.
【作者單位】： 濱州醫(yī)學院葡萄酒學院;濱州醫(yī)學院藥學院方劑效應與臨床評價國家中醫(yī)藥管理局重點實驗室;淄博市沂源縣人民醫(yī)院;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(81541158;8150131039) 山東省優(yōu)秀中青年科學家科研獎勵基金資助項目(BS2014YY051) 山東省自然科學基金資助項目(ZR2015PH002) 山東省醫(yī)藥衛(wèi)生科技發(fā)展計劃基金資助項目(2014WS0479) 山東省高�？萍加媱澔鹳Y助項目(J15LM51;J15LE51)
【分類號】：R392-33

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