【摘要】：背景及目的 Cajal間質(zhì)細(xì)胞(interstitial cells of cajal,ICC)是首先在消化道中被發(fā)現(xiàn),分布在自主神經(jīng)末梢和平滑肌細(xì)胞之間一種特殊間質(zhì)細(xì)胞。研究表明,ICC細(xì)胞可以起搏胃腸道基本電節(jié)律(basic electrical rhythm, BER),其突起形成的網(wǎng)絡(luò)能夠傳播BER;ICC細(xì)胞還可作為壁內(nèi)神經(jīng)信息向平滑肌傳送的中轉(zhuǎn)站,并對(duì)有關(guān)信號(hào)起整合作用,尤其在調(diào)節(jié)NO依賴(lài)性的神經(jīng)遞質(zhì)方面起重要作用。隨著對(duì)ICC細(xì)胞研究的深入,Smet等在豚鼠和人的膀胱上發(fā)現(xiàn)了ICC細(xì)胞,接著又在人和動(dòng)物的輸尿管、腎盂等多個(gè)部位也發(fā)現(xiàn)了ICC細(xì)胞。同時(shí),Ross等通過(guò)免疫組化發(fā)現(xiàn)泌尿系ICC細(xì)胞與神經(jīng)聯(lián)系緊密,并可能參與神經(jīng)元對(duì)平滑肌的調(diào)控。 自主神經(jīng)系統(tǒng)在輸尿管的收縮和舒張運(yùn)動(dòng)中起到了重要的作用,交感神經(jīng)可以通過(guò)α受體和β受體來(lái)分別引起輸尿管的收縮和舒張,膽堿能神經(jīng)通過(guò)作用于毒蕈堿受體來(lái)調(diào)控輸尿管的收縮。交感神經(jīng)分泌的腎上腺素能神經(jīng)遞質(zhì)能夠作用于β腎上腺素能受體,從而引起輸尿管的舒張。β受體可以分成β1、β2和β3三個(gè)亞型,在很多哺乳動(dòng)物的輸尿管上,存在β腎上腺素能受體亞型的分布,比如狗的輸尿管表達(dá)β3、大鼠的輸尿管表達(dá)β1、兔子的輸尿管表達(dá)β2、豚鼠只表達(dá)β3,而人可以表達(dá)β1、β2和β3,腎上腺素能神經(jīng)遞質(zhì)作用于相關(guān)β受體亞型后,可以降低輸尿管的收縮力和改變輸尿管的收縮形式,在輸尿管的舒張運(yùn)動(dòng)中起到重要作用。 在胃腸道中,ICC細(xì)胞可以表達(dá)多種神經(jīng)受體,如嘌呤能受體、膽堿能、緩激肽受體和前列腺素受體。我們前期研究表明,輸尿管ICC細(xì)胞膜上表達(dá)膽堿能受體并且參與了膽堿能神經(jīng)對(duì)輸尿管收縮的調(diào)控。那么,輸尿管ICC細(xì)胞是否表達(dá)β腎上腺素能受體并參與腎上腺素能神經(jīng)對(duì)輸尿管運(yùn)動(dòng)的調(diào)控?目前國(guó)內(nèi)外還未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。本研究通過(guò)免疫熒光染色的方法直接觀察ICC細(xì)胞上β腎上腺素受體亞型的表達(dá)情況;以及通過(guò)測(cè)定豚鼠輸尿管肌條興奮性和收縮性的方法,觀察Glivec特異性阻斷ICC細(xì)胞后,對(duì)β腎上腺素能受體激動(dòng)劑舒張輸尿管肌條功能的影響,來(lái)研究輸尿管ICC細(xì)胞在輸尿管收縮和舒張功能調(diào)節(jié)中的作用。從而,初步探討輸尿管ICC細(xì)胞在腎上素能神經(jīng)遞質(zhì)傳遞中的作用,結(jié)果有助于進(jìn)一步闡明輸尿管神經(jīng)調(diào)控機(jī)制,為輸尿管收縮和舒張功能異常的研究提供新的切入點(diǎn)。 方法 本課題以成年豚鼠為研究對(duì)象。(1)形態(tài)學(xué)觀察:采用免疫熒光染色法,在激光共聚焦顯微鏡下觀察輸尿管ICC細(xì)胞上β腎上腺素受體亞型(β1、β2和β3)的表達(dá);(2)功能學(xué)研究:在體外,運(yùn)用肌條實(shí)驗(yàn)方法,對(duì)比實(shí)驗(yàn)組(阻斷了ICC細(xì)胞的肌條)和對(duì)照組(正常豚鼠肌條)在β受體激動(dòng)劑作用下興奮性及收縮性的變化,來(lái)研究ICC細(xì)胞上β腎上腺素受體的功能以及ICC細(xì)胞對(duì)β腎上腺素受體的功能的影響。 結(jié)果 1.激光共聚焦顯微鏡下觀察顯示,豚鼠輸尿管內(nèi)可見(jiàn)c-kit染色陽(yáng)性的輸尿管ICC細(xì)胞。 2.輸尿管ICC細(xì)胞表達(dá)β3受體,未見(jiàn)β1、β2受體表達(dá)。 3.在一定前負(fù)荷下(2.0g),輸尿管肌條出現(xiàn)自發(fā)性收縮,CGP12177(選擇性β3受體激動(dòng)劑)可引起自發(fā)性收縮振幅顯著降低,自發(fā)性收縮頻率減慢;表明β3受體激動(dòng)劑能夠?qū)﹄嗍筝斈蚬墚a(chǎn)生舒張效應(yīng)。 4. Glivec阻斷輸尿管ICC細(xì)胞后,CGP12177對(duì)輸尿管肌條的自發(fā)性收縮的舒張效應(yīng)減弱;表明ICC細(xì)胞能夠影響輸尿管β3受體的舒張功能。 5.異丙腎上腺素能夠引起肌條的舒張;Glivec阻斷輸尿管ICC細(xì)胞后,異丙腎上腺素對(duì)輸尿管肌條的自發(fā)性收縮的舒張效應(yīng)亦減弱�？梢�(jiàn),ICC細(xì)胞參與了異丙腎上腺素對(duì)輸尿管的舒張作用,即表明ICC細(xì)胞可能參與腎上腺素能神經(jīng)遞質(zhì)對(duì)輸尿管的舒張作用,并可能介導(dǎo)腎上腺素能神經(jīng)遞質(zhì)的傳遞。 結(jié)論 1.豚鼠輸尿管ICC細(xì)胞上表達(dá)腎上腺素能β3受體。 2.激動(dòng)ICC細(xì)胞上β3受體能夠引起輸尿管舒張。 3.ICC細(xì)胞可能介導(dǎo)腎上腺素能神經(jīng)遞質(zhì)的傳遞。 4.腎上腺素能神經(jīng)可能通過(guò)激活I(lǐng)CC細(xì)胞上的腎上腺素β3受體來(lái)調(diào)節(jié)輸尿管舒張。
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【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類(lèi)號(hào)】：R329

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 李應(yīng)龍;王江平;丁國(guó)富;王勤章;;膀胱“Cajal樣間質(zhì)細(xì)胞”的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2007年02期

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本文編號(hào)：2315197