發(fā)布時間：2018-09-19 06:20

【摘要】：背景:研究報道,人間充質干細胞用于實驗動物研究的結果不令人滿意,所以考慮使用大鼠胎盤來源的間充質干細胞用于動物實驗研究,以期獲得更好的實驗結果。查閱國內外相關文獻,目前尚未發(fā)現(xiàn)大鼠胎盤來源間充質干細胞的相關報道。目的:建立從大鼠胎盤分離間充質干細胞的方法,觀察其基本生物學特性。方法:通過膠原酶消化法從大鼠胎盤分離并得到間充質干細胞。每天用倒置顯微鏡觀察其形態(tài)。用MTT法測定其生長動力學并繪制生長曲線。用流式細胞儀檢測其表型及細胞周期。通過免疫組化法證實其成脂及成骨分化的潛能。結果與結論:原代細胞培養(yǎng)8h后細胞貼壁,24h內細胞形成集落,第4代細胞大小、形態(tài)基本一致,以梭形為主。細胞周期檢測提示G0/G1期、S期、G2期的比例分別為83.76%,8.01%,8.23%。免疫表型分析其表達CD29和CD90,不表達CD45。體外誘導實驗證實胎盤間充質干細胞具有成脂和成骨分化的潛能。
[Abstract]:Background: it is reported that the results of human mesenchymal stem cells used in experimental animals are not satisfactory, so we consider using mesenchymal stem cells from rat placenta to obtain better results. There are no reports of rat placenta derived mesenchymal stem cells. Aim: to establish a method for isolating mesenchymal stem cells from rat placenta and observe its basic biological characteristics. Methods: mesenchymal stem cells were isolated from rat placenta by collagenase digestion. The shape was observed by inverted microscope every day. The growth kinetics was measured by MTT method and the growth curve was drawn. The phenotype and cell cycle were detected by flow cytometry. The potential of adipogenic and osteogenic differentiation was confirmed by immunohistochemical method. Results and conclusion: after 8 hours of primary cell culture, the cells were colonized within 24 hours. The size and morphology of the fourth passage cells were basically the same, mainly fusiform. Cell cycle detection showed that the proportion of G 2 phase in S phase of G0/G1 phase was 83.768.01 and 8.23%, respectively. Immunophenotypic analysis: expression of CD29 and CD90, does not express CD45. In vitro induction experiments confirmed that placental mesenchymal stem cells had the potential of adipogenic and osteogenic differentiation.
【作者單位】： 暨南大學醫(yī)學院;中國醫(yī)學科學院血液學研究所泰達生命科學技術研究中心;中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院血液學研究所實驗血液學國家重點實驗室;廣州漢氏聯(lián)合生物科技有限公司;
【基金】：廣東省科技廳省部產(chǎn)學研結合示范基地項目(廣東省干細胞產(chǎn)業(yè)化基地,項目編號:2010B091101004)支持~~
【分類號】：R329

【參考文獻】

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【共引文獻】

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本文編號：2249300