【摘要】：目的探究血清淀粉樣蛋白A(SAA)能否在體外誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞形成中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)(NETs)。方法建立穩(wěn)定的體外誘導(dǎo)NETs形成方法,包括外周血中性粒細(xì)胞的分離、細(xì)胞體外培養(yǎng)、NETs的誘導(dǎo)和形態(tài)學(xué)觀察。提取健康志愿者的外周血中性粒細(xì)胞,分為陰性對照(NC)組、SAA組和脂多糖(LPS)組,給予相應(yīng)的刺激后,觀察NETs的形成并計(jì)算百分率,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測培養(yǎng)上清中人組蛋白3(h3)的含量。結(jié)果提取的外周血中性粒細(xì)胞純度與細(xì)胞活力均在95%以上。顯微鏡下觀察到部分細(xì)胞的細(xì)胞核失去原有核型,向外擴(kuò)散形成網(wǎng)狀,即NETs。與NC組相比,接受SAA刺激的中性粒細(xì)胞有更多的NETs形成(P0.05)。培養(yǎng)液上清中的h3含量顯著高于NC組(P0.05)。結(jié)論 SAA可在體外誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞形成NETs。
[Abstract]:Objective to investigate whether serum amyloid A (SAA) can induce neutrophils to form neutrophil extracellular entrapment net (NETs).) in vitro. Methods A stable method was established to induce the formation of NETs in vitro, including the isolation of peripheral blood neutrophils, the induction of cell culture in vitro and the morphological observation. The peripheral blood neutrophils of healthy volunteers were divided into negative control (NC) group and lipopolysaccharide (LPS) group. After stimulation, the formation of NETs was observed and the percentage of NETs was calculated. The content of human histone 3 (H3) in culture supernatant was detected by (ELISA). Results the purity and viability of neutrophils were above 95%. Microscopically, the nuclei of some cells lost their original karyotype and diffused outward to form a reticular form, that is, NETs.. Compared with NC group, neutrophils stimulated by SAA had more NETs formation (P0.05). The content of H3 in supernatant of culture medium was significantly higher than that in NC group (P0.05). Conclusion SAA can induce neutrophils to form NETs. in vitro.
【作者單位】： 天津醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)院免疫學(xué)教研室;天津市天津醫(yī)院;天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院;
【基金】：天津市應(yīng)用基礎(chǔ)與前沿技術(shù)研究計(jì)劃項(xiàng)目(14JCYBJC25600)
【分類號】：R392

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本文編號：2201180