發(fā)布時(shí)間：2018-08-19 05:48

【摘要】：本文研究高粱外種皮原花青素四聚體(sorghum episperm procyanidin tetramer,SEPT)對(duì)遠(yuǎn)緣鏈球菌6715(S.sobrinus 6715)初始粘附及其致齲毒力因子-葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(glucosyltransferase,GTF)的抑制效果。采用唾液包被羥基磷灰石(saliva coated hydroxylapatite,SHA)體外模型研究SEPT對(duì)S.sobrinus 6715初始粘附的影響。通過(guò)PCR擴(kuò)增S.sobrinus 6715 GTF-I的催化活性區(qū)(catalytic region,CAT)的基因片段到質(zhì)粒Pgex-4T-1中,轉(zhuǎn)化至大腸桿菌T7 Express competent,IPTG誘導(dǎo)表達(dá),純化濃縮表達(dá)產(chǎn)物,獲得目標(biāo)蛋白GTF-I/CAT。再用不同濃度SEPT處理GTF-I/CAT,根據(jù)其水不溶性多糖產(chǎn)量(water insoluble glucosyltransferase,WIS)評(píng)價(jià)SEPT對(duì)GTF-I/CAT酶活力的抑制。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,SEPT能夠有效抑制S.sobrinus 6715在SHA的初始粘附,并具有一定的濃度效應(yīng)關(guān)系;通過(guò)基因克隆表達(dá)獲得的GTF-I/CAT蛋白酶活為8.446 m IU,產(chǎn)多糖能力為1.603 mg/(mg·h)。SEPT能明顯抑制GTF-I/CAT產(chǎn)生WIS(p0.01)。說(shuō)明SEPT既可以有效抑制S.sobrinus 6715的初始粘附過(guò)程,又可以通過(guò)作用GTF-I的CAT區(qū)減少WIG的合成,抑制蔗糖依賴性粘附減少S.sobrinus 6715在牙齒表面的粘附聚集,從而干預(yù)齲齒的發(fā)生。
[Abstract]:The inhibitory effect of sorghum outer seed coat (sorghum episperm procyanidin tetramerosome SEPT on the initial adhesion of Streptococcus distalis 6715 (S.sobrinus 6715) and its caries virulence factor glucosyltransferase (GTF) was studied. In vitro model of salivary coated hydroxyapatite (saliva coated hydroxylapatite was used to study the effect of SEPT on the initial adhesion of S.sobrinus 6715. The catalytic region cat gene fragment of S.sobrinus 6715 GTF-I was amplified by PCR and transformed into plasmid Pgex-4T-1, then transformed into E. coli T7 Express competence IPTG to induce expression, purified the concentrated expression product, and obtained the target protein GTF-I / CAT. GTF-I / CAT was treated with different concentrations of SEPT, and the inhibition of SEPT on the activity of GTF-I/CAT was evaluated by (water insoluble glucosyltransferase (WIS). The results showed that sept could effectively inhibit the initial adhesion of S.sobrinus 6715 to SHA and had a certain concentration effect relationship, and the activity of GTF-I/CAT protease expressed by gene cloning was 8.446 m, and the ability of producing polysaccharide was 1.603 mg/ (mg h). SEPT could significantly inhibit the production of WIS by GTF-I/CAT (p0.01). The results indicated that SEPT could effectively inhibit the initial adhesion of S.sobrinus 6715, reduce the synthesis of WIG by the CAT region of GTF-I, and inhibit sucrose dependent adhesion to reduce the adhesion and aggregation of S.sobrinus 6715 on the surface of teeth, thus interfering with the occurrence of dental caries.
【作者單位】： 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院環(huán)境食品學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;普健生物(武漢)科技有限公司;
【基金】：國(guó)家自然基金項(xiàng)目(31271939)
【分類(lèi)號(hào)】：R378.12

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本文編號(hào)：2190780