人胎盤(pán)絨毛膜間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng):組織塊法的優(yōu)化
本文選題:胎盤(pán) + 絨毛膜; 參考:《中國(guó)組織工程研究》2017年21期
【摘要】:背景:關(guān)于人胎盤(pán)絨毛膜間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)方法的研究很多,但是如何簡(jiǎn)便、快捷獲得大量原代培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞的問(wèn)題尚未解決。目的:探討優(yōu)化人胎盤(pán)絨毛膜間充質(zhì)干細(xì)胞體外分離培養(yǎng)組織塊法的最佳方法。方法:無(wú)菌條件下,取正常足月剖宮產(chǎn)胎盤(pán)絨毛膜,用勻漿器處理組織塊,采用組織塊法貼壁分離培養(yǎng)人胎盤(pán)絨毛膜間充質(zhì)干細(xì)胞,經(jīng)初次培養(yǎng)的組織塊進(jìn)行再次接種培養(yǎng)。結(jié)果與結(jié)論:用電動(dòng)勻漿器處理人胎盤(pán)絨毛膜省時(shí)省力,組織分散度和去除紅細(xì)胞效果好。初次培養(yǎng)和再次培養(yǎng)獲得細(xì)胞的平均時(shí)間分別為(17.73±1.14)d和(10.03±1.30)d。每個(gè)Φ100 mm培養(yǎng)皿獲得的原代細(xì)胞分別為(6.97±0.98)×10~5個(gè)和(13.82±1.44)×10~5個(gè)。獲得的貼壁細(xì)胞呈典型的成纖維細(xì)胞形態(tài),呈平行或漩渦狀生長(zhǎng),高表達(dá)CD90、CD73、CD105,而CD45、CD34、CD14、CD19、HLA-DR為陰性。細(xì)胞可向成骨、成脂方向誘導(dǎo)分化。結(jié)果表明優(yōu)化的方法能夠簡(jiǎn)便、快捷地處理人胎盤(pán)絨毛膜組織,獲得大量的原代間充質(zhì)干細(xì)胞。
[Abstract]:Background: there are many studies on isolation and culture methods of human placental chorionic mesenchymal stem cells, but the problem of how to obtain a large number of primary cultured mesenchymal stem cells quickly and simply has not been solved. Aim: to study the optimal method for isolation and culture of human placental chorionic mesenchymal stem cells in vitro. Methods: human placental chorionic mesenchymal stem cells were isolated and cultured with tissue block adherent method under aseptic condition. The chorionic chorion of normal full-term caesarean section was treated with homogenizer. The first cultured tissue mass was inoculated again. Results & conclusion: the treatment of human placenta chorion with electric homogenate was time saving, tissue dispersion and erythrocyte removal were better. The average time of primary culture and reculture was 17.73 鹵1.14 days and 10.03 鹵1.30 days, respectively. The primary cells were 6.97 鹵0.98 脳 10 ~ 5 and 13.82 鹵1.44 脳 10 ~ 5 per 桅 100mm culture dish, respectively. The adherent cells showed typical fibroblast morphology and grew in parallel or whirlpool shape with high expression of CD90, CD73 and CD105, while CD45, CD34, CD14, CD19 and HLA-DR were negative. Cells can be osteoblast, adipogenic direction induced differentiation. The results showed that the optimized method was simple and rapid in processing human placental chorionic tissues and a large number of primary mesenchymal stem cells were obtained.
【作者單位】: 廣州醫(yī)科大學(xué)附屬?gòu)V州市婦女兒童醫(yī)療中心;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81102248) 廣東省醫(yī)學(xué)科研基金(B2010274) 廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2014A020 212027) 廣州市婦女兒童醫(yī)療中心兒科研究所基金(YIP-2016-014)~~
【分類號(hào)】:R329.2
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】
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10 黃q諛,
本文編號(hào):2007800
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