本文選題：核酸疫苗 + Hsp90　； 參考：《東北師范大學(xué)》2011年碩士論文

【摘要】：核酸疫苗(DNA vaccine)是指將含有編碼某種抗原蛋白的外源基因序列插入到質(zhì)粒載體中,該重組質(zhì)粒就稱為核酸疫苗。核酸疫苗又稱為基因疫苗。核酸疫苗是繼病原體疫苗、亞單位疫苗之后出現(xiàn)的第三代疫苗,與傳統(tǒng)的疫苗相比具有多價(jià)、高效、價(jià)廉、安全等許多優(yōu)勢(shì)。 白色念珠菌(Candida albicans)是一種寄生在動(dòng)物和人的口腔和胃腸道的條件致病菌,它可以在機(jī)體免疫力下降和正常菌群失調(diào)時(shí)作為機(jī)會(huì)病原體,引起機(jī)體的淺層感染(也稱粘膜性感染)和系統(tǒng)性感染(也稱深層感染或全身性感染)。系統(tǒng)性白色念珠菌感染危害巨大,據(jù)科學(xué)家統(tǒng)計(jì),在使用了抗真菌藥物后,該病的死亡率仍高達(dá)70%以上。隨著發(fā)病率和致死率的不斷增加,越來(lái)越多的科學(xué)工作者投入到白色念珠菌免疫學(xué)機(jī)制的研究中。 英國(guó)曼徹斯特醫(yī)學(xué)院的Matthews等人長(zhǎng)期從事白色念珠菌免疫學(xué)方面的研究,他們發(fā)現(xiàn)在系統(tǒng)性白色念珠菌感染中熱休克蛋白90(Hsp90)起著主要的病理學(xué)作用。并確定了Hsp90的抗原表位圖譜,發(fā)現(xiàn)了2個(gè)能夠與病人血清起反應(yīng)的常見表位,即表位C和H,表位C是一種保守表位,能夠與所有病人的血清起反應(yīng);表位H是白色念珠菌所特有的一種表位,它能夠被大約50%的病人血清識(shí)別。 本實(shí)驗(yàn)選擇了Hsp90全基因序列中含有編碼C、H表位的一段DNA序列,構(gòu)建了核酸疫苗pcDNA3.1/Hsp90。通過(guò)肌肉注射后電轉(zhuǎn)(electroporation)的方式免疫小鼠, Western blot結(jié)果表明:經(jīng)熱休克蛋白90重組質(zhì)粒(pcDNA3.1/Hsp90)免疫小鼠抗血清中產(chǎn)生了抗熱休克蛋白90重組蛋白(R-Hsp90)特異性抗體; ELISA結(jié)果表明:經(jīng)pcDNA3.1/Hsp90組免疫后小鼠抗血清中抗R-Hsp90特異性抗體IgG的抗體含量,與pcDNA3.1組和PBS組比較得到了顯著提高(P0.01)。本實(shí)驗(yàn)為進(jìn)一步研究白色念珠菌核酸疫苗奠定了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。
[Abstract]:Nucleic acid vaccine (DNA accine) is a recombinant plasmid called nucleic acid vaccine by inserting the foreign gene sequence which encodes a certain antigen protein into the plasmid vector. Nucleic acid vaccines are also called genetic vaccines. Nucleic acid vaccine is the third generation vaccine after pathogen vaccine and subunit vaccine. Compared with traditional vaccine, nucleic acid vaccine has many advantages, such as multivalent, high efficiency, low price, safety and so on. Candida albicansis, a opportunistic pathogen that parasitizes the oral and gastrointestinal tract of animals and humans, can act as an opportunistic pathogen when the body's immunity declines and its normal flora is dysfunctional. Causes superficial infection (also known as mucosal infection) and systemic infection (also known as deep infection or systemic infection). Systemic Candida albicans infection is harmful, according to scientists statistics, after the use of antifungal drugs, the death rate is still as high as 70%. With the increasing incidence and fatality rate, more and more scientists are involved in the study of immunological mechanism of Candida albicans. Matthews et al., from Manchester Medical College in England, have long been involved in the immunological study of Candida albicans. They have found that heat shock protein 90 (Hsp90) plays a major role in the pathogenesis of systemic Candida albicans infection. The antigenic epitope map of Hsp90 was determined. Two common epitopes, epitopes C and H, were found to react with the sera of patients. Epitope C was a conserved epitope and could react with the sera of all patients. Epitope H, a specific epitope of Candida albicans, can be recognized by about 50% of patient serum. In this study, we selected a sequence of DNA encoding CnH epitope in the whole Hsp90 gene sequence, and constructed pcDNA3.1 / Hsp90 nucleic acid vaccine. , Western blot was immunized by electroporation of mice after intramuscular injection. The results showed that the anti-heat shock protein 90 recombinant protein R-Hsp90 antibody was produced in the antiserum of mice immunized with recombinant plasmid pcDNA3.1 / Hsp90. Ming: the antibody content of anti R-Hsp90 specific antibody IgG in the antiserum of mice immunized with pcDNA3.1/Hsp90 group, Compared with pcDNA3.1 group and PBS group, there was a significant increase in P0.01. This study laid a solid foundation for further study of Candida albicans nucleic acid vaccine.
【學(xué)位授予單位】：東北師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R392

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本文編號(hào)：1961528