HEV保護(hù)性抗體的制備與功能研究
本文選題:戊型肝炎病毒 + 基因免疫。 參考:《中國(guó)輸血雜志》2017年05期
【摘要】:目的研究基于戊型肝炎病毒中和表位(p179)的小鼠單克隆抗體的HEV中和保護(hù)作用。方法構(gòu)建含HEV中和表位p179基因的真核表達(dá)質(zhì)粒venus-179,以尾靜脈注射方法對(duì)BALB/c小鼠實(shí)施基因免疫,ELISA法檢測(cè)免疫后小鼠血清中抗體應(yīng)答水平,通過(guò)單克隆抗體的方法制備HEV抗體,通過(guò)C3A細(xì)胞株人HEV細(xì)胞感染模型,采用RT-PCR法檢測(cè)中和試驗(yàn)后保護(hù)性抗體的中和活性。結(jié)果成功制備了6株針對(duì)戊型肝炎病毒中和表位(p179)的抗體,其中抗體株2G8F9能有效中和HEV病毒,證實(shí)其產(chǎn)生的特異性抗體能夠有效阻斷HEV感染易感細(xì)胞C3A,具有中和HEV的活性。結(jié)論戊型肝炎病毒中和表位(p179)的基因疫苗venus-179免疫小鼠制備的單克隆抗體具有中和作用的免疫應(yīng)答。
[Abstract]:Objective to study the HEV neutralization of mouse monoclonal antibody based on neutralizing epitope p179 of hepatitis E virus (HEV). Methods the eukaryotic expression plasmid venus-179 containing the HEV neutralizing epitope p179 was constructed. The antibody response level in serum of BALB/c mice was detected by gene immunosorbent assay (Elisa) with tail vein injection, and the HEV antibody was prepared by monoclonal antibody method. The neutralizing activity of protective antibody after neutralization test was detected by RT-PCR method by using C3A cell line human HEV cell infection model. Results six strains of antibodies against hepatitis E virus neutralizing epitope p179) were successfully prepared. The antibody strain 2G8F9 can effectively neutralize HEV virus. It is proved that the specific antibody produced by the antibody can effectively block the infection of HEV susceptible cell C3A and has the activity of neutralizing HEV. Conclusion the monoclonal antibody prepared by venus-179, a gene vaccine against hepatitis E virus neutralizing epitope (p179), has a neutralized immune response.
【作者單位】: 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院輸血研究所;南京紅十字血液中心;
【基金】:南京市醫(yī)學(xué)科技發(fā)展項(xiàng)目(ZKX15051)
【分類(lèi)號(hào)】:R392
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,本文編號(hào):1944485
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