本文選題：跨膜型TNF-α + 多克隆抗體��； 參考：《暨南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)與醫(yī)學(xué)版)》2017年01期

【摘要】：目的:設(shè)計(jì)和制備區(qū)分鼠跨膜型腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和分泌型TNF-α的多克隆抗體.方法:采用抗原肽預(yù)測軟件對跨膜型TNF-α表位進(jìn)行預(yù)測,合成跨膜型TNF-α24個(gè)氨基酸多肽,并與匙孔堿血藍(lán)蛋白偶聯(lián),家兔皮背部多點(diǎn)注射,收集分離血清,采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和流式細(xì)胞術(shù)鑒定其特異性.結(jié)果:制備出高效價(jià)的抗血清,該抗血清可特異性結(jié)合免疫原多肽,不與分泌型TNF-α發(fā)生交叉反應(yīng),流式細(xì)胞術(shù)顯示該抗血清可與細(xì)胞系NIH 3T3表達(dá)的跨膜型TNF-α發(fā)生特異性結(jié)合.結(jié)論:成功制備了跨膜型TNF-α特異性多克隆抗體,為區(qū)分跨膜型TNF-α和分泌型TNF-α生物學(xué)作用提供了新工具.
[Abstract]:Aim: to design and prepare polyclonal antibodies against transmembrane tumor necrosis factor- 偽 (TNF- 偽) and secretory TNF- 偽 (TNF- 偽). Methods: the antigenic peptide prediction software was used to predict the transmembrane TNF- 偽 epitope. 24 amino acid peptides of transmembrane TNF- 偽 were synthesized and coupled with keyhole alkaloid hemocyanin. The rabbit skin was injected with multiple points to collect and isolate serum. Enzyme linked immunosorbent assay (Elisa) and flow cytometry (FCM) were used to identify its specificity. Results: a high titer antiserum was prepared. The antiserum could specifically bind to the immunogen peptide and did not cross react with secretory TNF- 偽. Flow cytometry showed that the antiserum could specifically bind to the transmembrane TNF- 偽 expressed in cell line NIH 3T3. Conclusion: transmembrane TNF- 偽 specific polyclonal antibody was successfully prepared, which provides a new tool for distinguishing the biological effects of transmembrane TNF- 偽 and secretory TNF- 偽.
【作者單位】： 貴州省骨科醫(yī)院檢驗(yàn)科;貴州省人民醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【基金】：貴州省科學(xué)技術(shù)基金(20142086)
【分類號(hào)】：R392

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本文編號(hào)：1938861