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L-精氨酸激活人肝細胞中內(nèi)源凝血因子Ⅷ的表達

發(fā)布時間:2018-05-01 13:17

  本文選題:人凝血因子Ⅷ + L-精氨酸 ; 參考:《重慶醫(yī)科大學(xué)》2012年碩士論文


【摘要】:目的利用L-精氨酸加入人肝細胞LO2培養(yǎng)基中,觀察LO2中內(nèi)源凝血因子Ⅷ(coagulation factor Ⅷ,F(xiàn)Ⅷ)的表達情況,研究L-精氨酸激活LO2中內(nèi)源FⅧ表達的調(diào)控機制。 方法將LO2分為實驗組和對照組,實驗組加入L-精氨酸(終濃度為10mmol/L)分別培養(yǎng)24、36、48和60h,對照組用同體積滅菌水取代L-精氨酸培養(yǎng)。用RT-PCR方法檢測LO2中人FⅧ基因的轉(zhuǎn)錄水平并測序鑒定,,一期法檢測細胞培養(yǎng)上清液中的人FⅧ促凝活性(FⅧ:C),Western blot分別檢測作用24、48h后LO2中人FⅧ基因的表達,免疫熒光染色結(jié)合激光共聚焦顯微鏡觀察作用48h后LO2中人FⅧ的表達。 結(jié)果RT-PCR顯示,加L-精氨酸培養(yǎng)36、48、60h后,LO2中有人FⅧ mRNA的轉(zhuǎn)錄,而對照組未出現(xiàn)人FⅧ mRNA的轉(zhuǎn)錄;一期法檢測各組細胞上清液中人FⅧ:C差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P㧐0.05);Western blot及激光共聚焦均觀察到加L-精氨酸培養(yǎng)48h后LO2中出現(xiàn)人FⅧ的表達,而對照組的細胞中均未有人FⅧ的表達。 結(jié)論L-精氨酸可激活人正常肝細胞中內(nèi)源人FⅧ的表達,其調(diào)控的機制有待進一步研究。
[Abstract]:Objective to observe the expression of endogenous coagulation factor 鈪

本文編號:1829517

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