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miRNA-17-5p在免疫細胞炎癥反應和自噬中的作用

發(fā)布時間:2018-04-24 23:30

  本文選題:脂多糖 + 炎癥; 參考:《廣東醫(yī)學》2016年12期


【摘要】:目的探討脂多糖(LPS)誘導免疫細胞炎癥反應和自噬中miRNA-17-5p的調控作用。方法體外培養(yǎng)人白血病單核細胞株(THP-1),100 ng/m L佛波醇將THP-1細胞誘導24 h分化成為巨噬細胞,設置空白對照組和LPS刺激組,其中LPS刺激組加500 ng/m L的LPS,空白對照組只加滅菌水。刺激THP-1巨噬細胞12 h后采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測細胞培養(yǎng)上清液中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)蛋白水平;采用定量PCR反應檢測基因miRNA-17-5p、PTEN的表達情況,采用Western blot檢測P62蛋白水平。結果與空白對照組比較,LPS刺激組培養(yǎng)上清液中TNF-α、MCP-1蛋白分泌量顯著增加(P0.01),PTEN表達顯著下調(P0.01),細胞內miRNA-17-5p顯著上調(P0.01),細胞內P62蛋白表達上調(P0.05)。結論 miRNA-17-5p參與LPS誘導的免疫細胞炎癥反應和自噬調控。
[Abstract]:Objective to investigate the inflammatory response of immune cells induced by lipopolysaccharide (LPS) and the regulation of miRNA-17-5p in autophagy. Methods Human leukemic monocytes were cultured in vitro. THP-1 cells were induced to differentiate into macrophages for 24 h by 100 ng/m / L phorbol alcohol. The blank control group and LPS stimulated group were divided into two groups: LPS stimulated group plus 500 ng/m L LPSs, and blank control group only added sterilizing water. After 12 h stimulation of THP-1 macrophages, the levels of tumor necrosis factor- 偽 (TNF- 偽) and monocyte chemoattractant protein (MCP-1) in the supernatant of cell culture were detected by Elisa, and the expression of miRNA-17-5pPTEN gene was detected by quantitative PCR reaction. The level of P62 protein was detected by Western blot. Results compared with the control group, the secretion of TNF- 偽 MCP-1 protein increased significantly in the culture supernatant of LPS-stimulated group, the expression of P0.01PTEN was down-regulated, the expression of miRNA-17-5p was up-regulated by P0.01T, and the expression of P62 protein was upregulated by P0.05A. Conclusion miRNA-17-5p is involved in LPS induced immune cell inflammation and autophagy.
【作者單位】: 廣州醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院健康體檢中心;廣東省婦幼保健院婦產科;廣州醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院重癥醫(yī)學科;
【基金】:廣東省科技計劃項目(編號:2012B031800233)
【分類號】:R363

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3 朱慧e,

本文編號:1798762


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