本文選題：人巨細(xì)胞病毒 + UL蛋白　； 參考：《中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年04期

【摘要】：目的應(yīng)用酵母雙雜交系統(tǒng)篩選與人巨細(xì)胞病毒(HCMV)UL145編碼蛋白相互作用的來源于人胎腦cDNA文庫的組織蛋白。方法采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增HCMV UL145片段,酶切及純化擴(kuò)增的目的片段及酵母表達(dá)載體p GBKT7,連接HCMV UL145片段及載體p GBKT7,將連接后的重組誘餌表達(dá)載體p GBKT7-UL145轉(zhuǎn)化到酵母菌AH109中,再將人胎腦文庫DNA也轉(zhuǎn)化到酵母AH109中,篩選與HCMV UL145編碼蛋白相互作用的蛋白,并對(duì)陽性克隆進(jìn)行測(cè)序和生物信息學(xué)分析。結(jié)果最終確認(rèn)多個(gè)克隆與HCMV UL145編碼蛋白相互作用,BLAST結(jié)果顯示3個(gè)與FOXG1高度同源。結(jié)論利用酵母雙雜交系統(tǒng)成功篩選出與HCMV UL145編碼蛋白相互作用的人胎腦c DNA文庫蛋白FOXG1,推測(cè)該目的蛋白在HCMV感染所致神經(jīng)系統(tǒng)損傷過程中起重要作用。
[Abstract]:Objective to screen the histone derived from human fetal brain cDNA library interacting with human cytomegalovirus (HCMV) UL145 protein by yeast two-hybrid system. Methods the HCMV UL145 fragment was amplified by polymerase chain reaction, the target fragment was digested and purified, and the yeast expression vector pGBKT7 was ligated to ligate the HCMV UL145 fragment and the vector pGBKT7. The recombinant bait expression vector p GBKT7-UL145 was transformed into the yeast AH109. Then the human fetal brain library DNA was transformed into yeast AH109 to screen the proteins interacting with HCMV UL145 coding protein, and the positive clones were sequenced and analyzed by bioinformatics. Results finally, three clones were confirmed to interact with HCMV UL145 coding protein. The results showed that three clones were highly homologous to FOXG1. Conclusion the human fetal brain c DNA library protein FOXG1 interacting with HCMV UL145 coding protein was successfully screened by yeast two-hybrid system. It is speculated that this protein plays an important role in nervous system injury induced by HCMV infection.
【作者單位】： 中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院生物樣本庫;吉林大學(xué)第一醫(yī)院兒科;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81171581)
【分類號(hào)】：R373

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本文編號(hào)：1781863