本文關鍵詞： miR-a 轉染 KGN細胞 FOXL 基因表達調控 細胞增殖　出處：《中國美容醫(yī)學》2016年01期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的:研究外源性microRNA-130a在卵巢顆粒細胞KGN中過表達對FOXL2基因表達的影響,探索microRNA-130a對KGN細胞增殖的影響。方法:人工設計合成靶向FOXL2基因的microRNA-130a模擬物,脂質體法將microRNA-130a模擬物轉染入KGN細胞中,Trizol法和RIPA蛋白裂解法分別獲取高純度的細胞總RNA和總蛋白,實時熒光定量聚合酶聯(lián)反應(FQ-PCR)檢測microRNA模擬物轉染后細胞中FOXL2基因mRNA表達水平,Western Blot檢測FOXL2蛋白表達水平,四甲基偶氮唑鹽法(MTT)檢測microRNA-130a轉染后KGN細胞的增殖情況。結果:成功轉染KGN細胞后,陰性對照組FOXL2基因mRNA和蛋白的表達水平與空白對照組相比無明顯的差異(P0.05),mi R-130a轉染組能顯著抑制FOXL2 mRNA和蛋白的表達,與空白對照組和陰性對照組相比均有統(tǒng)計學差異(P0.05)。MTT法檢測各組KGN細胞的OD值及細胞增值率,microRNA-130a轉染后能明顯促進KGN細胞的增殖,與與空白對照組和陰性對照組相比均有統(tǒng)計學差異(P0.05)。結論:外源性的mi R-130a對FOXL2基因mRNA和蛋白表達有明顯的抑制作用,且能明顯促進KGN細胞的增殖。
[Abstract]:Objective: to study the effect of exogenous microRNA-130a overexpression on FOXL2 gene expression in ovarian granulosa cell KGN and to explore the effect of microRNA-130a on the proliferation of KGN cells. Methods: microRNA-130a mimics targeting FOXL2 gene were designed and synthesized. MicroRNA-130a mimics were transfected into KGN cells by liposome method. The high purity total RNA and total protein were obtained by trizol and RIPA protein cleavage, respectively. The expression level of FOXL2 gene mRNA was detected by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (FQ-PCR) and the expression of FOXL2 protein was detected by Western Blot after transfection of microRNA mimics. The proliferation of KGN cells after transfection of microRNA-130a was detected by MTT. Results: after transfection of KGN cells, KGN cells were transfected successfully. The expression level of FOXL2 gene mRNA and protein in the negative control group was not significantly different from that in the blank control group. The expression of FOXL2 mRNA and protein was significantly inhibited in the transfected group. Compared with the blank control group and the negative control group, there were significant differences between the two groups. The OD value of KGN cells and the cell proliferation rate were detected by P0.05. MTT assay. MicroRNA-130a transfection could significantly promote the proliferation of KGN cells. Conclusion: exogenous mi R-130a can significantly inhibit the expression of FOXL2 gene mRNA and protein, and promote the proliferation of KGN cells.
【作者單位】： 濰坊醫(yī)學院整形外科研究所;
【基金】：國家自然科學基金(81272122 81301647 81471880) 山東省科技攻關計劃(JK67) 山東省自然科學基金(ZR2013HQ025)
【分類號】：Q78;R329.2
【正文快照】： FOXL2是叉頭框轉錄因子家族成員之一,主要表達在眼周、卵巢和垂體細胞中,該基因最早由Crisponi作為小瞼裂綜合征(BPES,Blepharophimosis Syndrome,MIM:110100)及卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)的候選基因被克隆定位[1]。小瞼裂綜合征是一種常染色體顯性遺傳病[2],臨

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本文編號：1491654