本文關(guān)鍵詞：人羊膜上皮細(xì)胞向卵泡樣結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)分化的實(shí)驗(yàn)研究　出處：《四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2017年04期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的研究人羊膜上皮細(xì)胞(human amniotic epithelial cells,hAECs)在人卵泡液的長(zhǎng)時(shí)間刺激下能否轉(zhuǎn)分化為卵泡樣結(jié)構(gòu)。方法在前期實(shí)驗(yàn)結(jié)果基礎(chǔ)上,體外分離培養(yǎng)hAECs,5%人卵泡液為誘導(dǎo)條件,延長(zhǎng)誘導(dǎo)時(shí)間至44d,倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變,化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)檢測(cè)培養(yǎng)基上清液中雌激素(estradiol,E2)水平的變化,實(shí)時(shí)熒光定量-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real time-polymerase chain reaction,RT-PCR)檢測(cè)雌性生殖細(xì)胞特異性基因(GDF9、DAZL、SCP3)表達(dá)情況。結(jié)果誘導(dǎo)組(添加有5%卵泡液的培養(yǎng)基)在培養(yǎng)第10天出現(xiàn)卵母細(xì)胞樣細(xì)胞(OLCs),隨著時(shí)間延長(zhǎng),OLCs體積增大,周圍見透明帶樣環(huán)變,隨后減小,部分消失;對(duì)照組無(wú)上述現(xiàn)象。誘導(dǎo)組DAZL及GDF9的mRNA表達(dá)水平較對(duì)照組升高(P0.05),并且具有兩個(gè)高峰;誘導(dǎo)組SCP3mRNA表達(dá)水平與對(duì)照組之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。誘導(dǎo)組有E2生成,其水平隨時(shí)間先下降后升高再下降;對(duì)照組無(wú)E2生成。結(jié)論在體外,hAECs具有向卵泡樣結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)分化的潛能。
[Abstract]:Objective to study human amniotic epithelial cells in human amniotic epithelial cells. HAECs could be transformed into follicle-like structure after long time stimulation of human follicular fluid. Methods on the basis of the preliminary results, 5% human follicular fluid was isolated and cultured in vitro. The induction time was extended to 44 days. The morphological changes of cells were observed by inverted microscope and the level of estradiolium E2 in the supernatant of culture medium was detected by chemiluminescence immunoassay. Real-time fluorescence quantification-polymerase chain reaction real time-polymerase chain reaction. The female germ cell specific gene (GDF9) was detected by RT-PCR. Results in the induction group (medium containing 5% follicular fluid), the oocyte like cells (OLCs) appeared on the 10th day of culture, and the volume of OLCs increased with time. Around the transparent zona-like ring change, then decreased, partially disappeared; The expression of mRNA in DAZL and GDF9 in the induced group was higher than that in the control group (P 0.05) and had two peaks. There was no significant difference in the expression of SCP3mRNA between the induction group and the control group (P 0.05). Conclusion hAECs have the potential to differentiate into follicle-like structure in vitro.
【作者單位】： 四川大學(xué)華西第二醫(yī)院婦產(chǎn)科;出生缺陷與相關(guān)婦兒疾病教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(四川大學(xué));陜西省人民醫(yī)院;
【基金】：四川省科技廳科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(No.2011SZ0137)資助
【分類號(hào)】：R339.2
【正文快照】： 近年來,婦科惡性腫瘤在世界范圍內(nèi)的發(fā)病率越來越高,且出現(xiàn)年輕化趨勢(shì)[1-2]。婦科惡性腫瘤常用的治療仍以手術(shù)為主,再輔以放化療,治療后最為突出的并發(fā)癥為卵巢結(jié)構(gòu)或功能受損所致的不孕和低雌激素水平相關(guān)的圍絕經(jīng)期綜合征。為解決這些問題,亟需尋求一種與體內(nèi)雌激素效價(jià)、代

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