發(fā)布時(shí)間：2018-01-09 05:24

  本文關(guān)鍵詞：Notch-1基因與人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞自噬相關(guān)性的研究　出處：《福建醫(yī)科大學(xué)》2012年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

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【摘要】：目的： 觀察上調(diào)和下調(diào)Notch-1基因表達(dá)時(shí)人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的自噬現(xiàn)象，探討Notch-1基因參與人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞自噬的可能機(jī)制。 方法： 利用表達(dá)Notch1-shRNA和Notch-1胞內(nèi)段（Notch-1intracellular domain,NICD）的慢病毒感染人膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞，通過(guò)RT-PCR和Western Blotting法鑒定Notch-1表達(dá)下調(diào)或NICD表達(dá)上調(diào)的U251細(xì)胞；應(yīng)用單丹（磺）酰戊二胺（Monodansylcadaverine，，MDC）染色法觀察細(xì)胞自噬現(xiàn)象；通過(guò)Western-blotting和細(xì)胞免疫染色法檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白LC-3（microtubule-associated protein1lightchain3，微管相關(guān)蛋白1輕鏈3）和Beclin-1的表達(dá)情況。 結(jié)果： Notch-1RNA干擾慢病毒能有效下調(diào)U251細(xì)胞Notch-1的表達(dá)，而NICD過(guò)表達(dá)慢病毒能顯著上調(diào)U251細(xì)胞NICD的表達(dá)；MDC熒光染色法發(fā)現(xiàn)，Notch-1下調(diào)的神經(jīng)膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞中可觀察到點(diǎn)狀自噬囊泡（autophagicvacuoles，AVs），Western-blotting和細(xì)胞免疫染色法結(jié)果顯示，在Notch-1表達(dá)下調(diào)的神經(jīng)膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞中，自噬相關(guān)蛋白LC-3和Beclin-1表達(dá)增高。 結(jié)論： Notch-1表達(dá)下調(diào)的人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞可觀察到自噬現(xiàn)象，Notch-1表達(dá)下調(diào)可能導(dǎo)致LC-3和Beclin-1表達(dá)上調(diào)而誘導(dǎo)膠質(zhì)瘤細(xì)胞自噬。
[Abstract]:Objective:
To observe the expression of Notch-1 gene up-regulated and down regulated autophagy in human glioma cells, and explore the possible mechanism of Notch-1 gene involved in autophagy in human glioma cells.
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本文編號(hào)：1400168