本文關(guān)鍵詞：KSHV K15蛋白多克隆抗體的制備及其初步鑒定　出處：《安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》2016年01期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的制備卡波氏肉瘤相關(guān)皰疹病毒(KSHV)K15蛋白多克隆抗體,并將其應(yīng)用于細(xì)胞內(nèi)K15蛋白的檢測。方法選擇K15基因第8個(gè)外顯子(K15P_(ex8))序列做為模板,構(gòu)建K15P_(ex8)的表達(dá)載體p QE-80L-K15P_(ex8)。誘導(dǎo)重組菌蛋白表達(dá),免疫新西蘭兔,制備抗K15P_(ex8)多克隆抗體,并用間接ELISA法測定抗體效價(jià)。將p FJ和p FJ-K15P兩種重組質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)入HEK 293T細(xì)胞,用Western blot法檢測抗K15P_(ex8)多克隆抗體對(duì)K15P-Flag蛋白的識(shí)別。結(jié)果由K15P_(ex8)制備的抗K15P_(ex8)多克隆抗體效價(jià)大于1∶6 400,能特異性識(shí)別重組質(zhì)粒p FJ-K15P轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞產(chǎn)生的K15P-Flag融合蛋白。結(jié)論初步證明K15P_(ex8)蛋白有免疫反應(yīng)性,該多克隆抗體可用于重組的K15P-Flag融合蛋白的檢測。
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學(xué)微生物學(xué)教研室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(編號(hào):81271837) 安徽高校省級(jí)自然科學(xué)研究項(xiàng)目(編號(hào):KJ2012A161) 安徽醫(yī)科大學(xué)博士科研經(jīng)費(fèi)資助項(xiàng)目(編號(hào):XJ200914)
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 2015-10-22接收卡波氏肉瘤相關(guān)皰疹病毒(Kaposi's sarcoma-as-sociated herpesvirus,KSHV)又被稱為人類皰疹病毒8型(human herpesvirus 8,HHV-8),于1994年Chang et al[1]在卡波氏肉瘤(Kaposi's sacoma,KS)組織中發(fā)現(xiàn),是引起KS的病原體[2]。研究[3]證明KSHV還是原發(fā)滲液性淋巴

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