本文關(guān)鍵詞：重組抗埃博拉病毒單克隆抗體質(zhì)控方法的建立

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【摘要】：目的重組抗埃博拉病毒抗體是由3種抗埃博拉病毒包膜糖蛋白(GP)的單抗組成的復(fù)方抗體,本實(shí)驗(yàn)分別對(duì)3種重組單抗的質(zhì)控方法進(jìn)行研究。方法利用ELISA方法測(cè)定重組抗埃博拉病毒單抗的結(jié)合活性;利用LC-MS肽圖法對(duì)其進(jìn)行鑒別;CE-SDS和SE-HPLC測(cè)定純度;i CIEF法測(cè)定等電點(diǎn)及電荷異質(zhì)性;切糖后對(duì)N-糖進(jìn)行2AB標(biāo)記,用正向色譜結(jié)合質(zhì)譜對(duì)其糖型和含巖藻糖修飾糖型比例分析;利用高效液相色譜法測(cè)定其聚山梨酯20含量。結(jié)果 3種重組抗埃博拉病毒單抗結(jié)合活性的EC50為(12.53±1.62)、(11.10±0.62)、(6.09±0.35)ng·m L~(-1);LC-MS肽圖法測(cè)定一級(jí)序列覆蓋率均大于95%;非還原CE-SDS主峰純度分別為(94.41±0.05)%、(95.58±0.17)%、(96.11±0.05)%;還原CE-SDS重鏈和輕鏈純度之和分別為(98.19±0.06)%、(97.97±0.03)%、(98.57±0.03)%;SE-HPLC主峰分別為(99.59±0.01)%、(99.56±0.01)%、(99.74±0.01)%;i CIEF分析主峰等電點(diǎn)為(8.70±0.01)、(8.26±0.01)、(8.85±0.01);3種單抗聚山梨酯20含量分別為(0.34±0.00)、(0.35±0.00)、(0.35±0.01)mg·m L~(-1);LC-MS對(duì)N糖譜分析相對(duì)靈敏,3種單抗含巖藻糖糖型比例均小于0.5%。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)的質(zhì)控方法研究運(yùn)用了現(xiàn)代化質(zhì)控理念,建立的質(zhì)控方法具有保證產(chǎn)品安全、有效、質(zhì)量可控的特點(diǎn),為突發(fā)狀況下埃博拉疫情防控提供了用藥儲(chǔ)備的技術(shù)支持,也為其他組合抗體的質(zhì)量控制積累了經(jīng)驗(yàn)。
【作者單位】： 中國(guó)食品藥品檢定研究院?jiǎn)慰寺】贵w產(chǎn)品室衛(wèi)生部生物技術(shù)產(chǎn)品檢定及標(biāo)準(zhǔn)化重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(xiàng)資助項(xiàng)目(2014ZX09304311-001,2012ZX09304010) 中國(guó)食品藥品檢定研究院中青年發(fā)展研究基金資助項(xiàng)目(2013NB1)
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 埃博拉病毒具有傳播途徑廣、感染種群復(fù)雜、毒性大、致死率高等特點(diǎn),是迄今為止人類所知最致命的傳染性病毒之一。埃博拉病毒2014年在西非大規(guī)模流行[1],在美國(guó)、西班牙等國(guó)家出現(xiàn)散發(fā)病例,已造成約10 000多人死亡。目前,有多項(xiàng)針對(duì)埃博拉病毒的預(yù)防性疫苗、治療性單抗以及核

【相似文獻(xiàn)】

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1 蘇潑曼;;抗埃博拉病毒抗體的動(dòng)物試驗(yàn)[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)情報(bào);2001年03期

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 沈基飛 陳冬;我首個(gè)抗埃博拉病毒藥物獲批[N];科技日?qǐng)?bào);2014年

2 記者 項(xiàng)錚;國(guó)際合作加快抗埃博拉病毒疫苗研發(fā)[N];科技日?qǐng)?bào);2014年

3 Julie Steenhuysen 編譯 高興華;FDA將快批抗埃博拉病毒藥[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2014年

4 本報(bào)記者 楊博;美股市場(chǎng)埃博拉概念獲熱捧[N];中國(guó)證券報(bào);2014年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 盧秀妹;抗埃博拉病毒和馬爾堡病毒核蛋白單克隆抗體的制備及特性鑒定[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

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本文編號(hào)：1274553