本文關(guān)鍵詞：嵌合HCV串聯(lián)多表位的乙肝S基因真核載體構(gòu)建及表達(dá)

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【摘要】：[目的]構(gòu)建丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)串聯(lián)多中和抗原表位與乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)S抗原嵌合基因真核表達(dá)質(zhì)粒,并在293T細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)。[方法]將HCV基因中高度保守且具有廣譜交叉中和活性的三個表位和一個HVR1模擬表位串連。串聯(lián)表位嵌合于HBV S基因的氨基端胞外區(qū),形成嵌合基因MEpS;將基因克隆至真核表達(dá)載體pCI-neo中,構(gòu)建重組質(zhì)粒pCI-MEpS。將質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至293T細(xì)胞中,間接免疫熒光及Western Blot檢測嵌合基因的表達(dá)情況。[結(jié)果]重組質(zhì)粒經(jīng)雙酶切證實(shí)構(gòu)建正確;pCI-MEpS轉(zhuǎn)染的293T細(xì)胞胞漿內(nèi)可見較強(qiáng)的綠色熒光,Western Blot顯示pCI-MEpS在相對分子量約38 kDa處可見蛋白條帶。[結(jié)論]構(gòu)建了HBV S抗原嵌合HCV串聯(lián)多中和抗原表位的重組質(zhì)粒,成功在293T細(xì)胞中表達(dá),為制備嵌合HCV串聯(lián)多中和抗原表位的HBV S抗原VLPs,研究嵌合VLPs免疫動物后產(chǎn)生的中和抗體的保護(hù)作用奠定了實(shí)驗基礎(chǔ)。
【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院臨床實(shí)驗與檢驗科;第四軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部微生物學(xué)教研室;西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)中心;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(“HCV中和抗原表位嵌合病毒樣顆粒誘導(dǎo)的中和抗體應(yīng)答研究”,No.81072500;“乙肝S抗原為載體的HCV嵌合病毒樣顆粒預(yù)防疫苗的初步實(shí)驗研究”,No.31370924)資助
【分類號】：R392
【正文快照】： 丙型肝炎病毒引起的肝炎呈世界性分布,感染后慢性化率高,全球目前大約有1.3~1.7億的慢性感染者[1]。丙型肝炎病毒感染慢性化導(dǎo)致肝臟炎癥壞死、肝纖維化甚至肝硬化和肝癌,持續(xù)性感染最終發(fā)展為肝硬化/肝癌的機(jī)率高達(dá)3.5%~20%[2]。HCV基因組高度變異,免疫逃避方式多樣,而且由于

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 明國春;李馳;;前S基因多肽(多聚人血清白蛋白受體)與乙型肝炎防治新前景[J];蚌埠醫(yī)藥;1987年01期

2 呂晴;朱啟昒;段恕誠;何建文;聞玉梅;;乙型肝炎疫苗免疫失敗小兒S基因變異及臨床特點(diǎn)研究[J];中華肝臟病雜志;1997年01期

3 彭桂福,王珊珊,姜普林,曾年華,王志斌;一對父親與胎兒所攜乙型肝炎病毒前S基因的序列分析[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2000年03期

4 洪國強(qiáng),吳宗華,胡波,朱振宇,李林;乙型肝炎病毒S基因在畢赤酵母中的表達(dá)及在乙型肝炎病毒表面抗體檢測中的應(yīng)用[J];中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志;2004年06期

5 戴晨陽,朱理珉,梁樹人,李順天,徐健,姚智;乙型肝炎病毒S基因直接測序分型方法的建立及應(yīng)用[J];中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志;2005年02期

6 蔣海青;朱平安;謝錦堯;金嫻;肖娜;樊春卉;趙毅;;深圳市乙肝疫苗免疫失敗者S基因分析[J];熱帶醫(yī)學(xué)雜志;2013年04期

7 魏駿飛;徐昭;李力;王志銳;楊東靖;陳錦英;;漢坦病毒S基因畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)的構(gòu)建[J];中國人獸共患病學(xué)報;2006年01期

8 徐艷玲;金立杰;;含前S基因的重組乙型肝炎疫苗研究進(jìn)展[J];中國生物制品學(xué)雜志;2007年09期

9 楊倩,董菁,成軍;乙型肝炎病毒基因組前-前-S基因區(qū)的分子流行病學(xué)研究[J];世界華人消化雜志;2004年04期

10 黃平;宋懷東;鄒麗容;李暉;俞守義;;2004年SARS-CoV毒株S基因分子進(jìn)化特征[J];中國人獸共患病學(xué)報;2006年10期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 任玲;李廣興;;豬傳染性胃腸炎病毒S基因核酸疫苗免疫功能變化的研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會獸醫(yī)病理學(xué)分會第十六次學(xué)術(shù)研討會、中國病理生理學(xué)會動物病理生理專業(yè)委員會第十五次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2009年

2 朱慧;周建華;吳衡生;方峰;;兒童乙型肝炎病毒相關(guān)性腎炎中乙型肝炎病毒S基因變異分析[A];中華醫(yī)學(xué)會第十四次全國兒科學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年

3 胡桂學(xué);關(guān)振宏;夏咸柱;喬軍;高鳳山;逄博;;大熊貓犬冠狀病毒S基因的擴(kuò)增、克隆與序列分析[A];人畜共患傳染病防治研究新成果匯編[C];2004年

4 周繼勇;沈行燕;程麗琴;丁紅梅;吳建祥;;新的禽傳染性支氣管炎病毒變異毒株S基因克隆[A];第四屆中國畜牧獸醫(yī)青年科技工作者學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2001年

5 雷宇;黎燕;王蜀強(qiáng);陳壓西;周智;任紅;;乙型肝炎病毒S基因四環(huán)素調(diào)控體系的構(gòu)建及其在真核細(xì)胞中的表達(dá)[A];中華醫(yī)學(xué)會第十二次全國病毒性肝炎及肝病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2005年

6 楊霞;陳陸;董加才;常洪濤;王新衛(wèi);王川慶;;豬傳染性胃腸炎病毒河南株S基因的克隆與序列分析[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜傳染病學(xué)分會第七屆全國會員代表大會暨第十三次學(xué)術(shù)研討會論文集（下冊）[C];2009年

7 雷宇;黎燕;王蜀強(qiáng);陳壓西;周智;任紅;;乙型肝炎病毒S基因四環(huán)素調(diào)控體系的構(gòu)建及其在真核細(xì)胞中的表達(dá)[A];第五屆全國肝臟疾病臨床暨中華肝臟病雜志成立十周年學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年

8 呂中偉;侯敏;蔡海東;袁雪宇;;乙肝病毒S基因啟動子的三鏈形成寡核苷酸的125碘標(biāo)記實(shí)驗研究[A];首屆全國分子核醫(yī)學(xué)暨分子影像學(xué)學(xué)術(shù)交流會資料匯編[C];2006年

9 張紹鈴;陳迪新;吳俊;吳華清;;梨不同花齡花柱S基因表達(dá)量與自交不親和性強(qiáng)度的關(guān)系[A];全國第四屆梨科研、生產(chǎn)與產(chǎn)業(yè)化學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2005年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 杜恒輝 朱立明;首次發(fā)現(xiàn)S基因?qū)说鞍椎淖饔肹N];科技日報;2006年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 陳迪新;梨花粉萌發(fā)、生長及花柱S基因表達(dá)特性[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

2 衡偉;薔薇科部分果樹S基因的鑒定、克隆及其特異性識別研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 秦雅群;慢性HBV感染者不同病程階段HBV前S基因缺失突變的比較分析[D];桂林醫(yī)學(xué)院;2015年

2 廖列如;犬冠狀病毒的分離鑒定及其S基因的克隆[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2007年

3 關(guān)振宏;大熊貓犬冠狀病毒S基因的擴(kuò)增、克隆和序列分析[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

4 高鳳山;大熊貓犬冠狀病毒的分離鑒定及S基因部分序列的測定和分析[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

5 彭樹英;豬傳染性胃腸炎病毒S基因乳腺特異性真核表達(dá)載體構(gòu)建的研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2004年

6 王萃瑜;豬流行性腹瀉病毒部分S基因的原核表達(dá)及間接ELISA檢測方法的建立[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

7 任曉峰;豬傳染性胃腸炎病毒TH-98株S基因的克隆與鑒定[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2001年

8 蘭云剛;豬血凝性腦脊髓炎病毒R、S基因的RNAi研究[D];吉林大學(xué);2011年

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