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一種快速核酸提取試劑在流感病毒檢測中的應(yīng)用評價

發(fā)布時間:2017-11-04 07:44

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【摘要】:目的探討一種快速核酸提取試劑在流感病毒檢測中的適用性及有效性。方法選取流感病毒H3亞型、乙型Yamagata系細胞株和甲型H1N1型雞胚株各1株,對其倍比稀釋液及2015年北京市流感病原學監(jiān)測陽性的67份咽拭子樣本,同時采用快速提取法及離心柱提取法提取病毒核酸,經(jīng)實時熒光PCR法進行定性、定量檢測,檢測結(jié)果采用SPSS19.0軟件進行統(tǒng)計分析。結(jié)果快速提取法提取細胞培養(yǎng)液、雞胚培養(yǎng)液中流感病毒核酸的最低檢測限高于離心柱法10倍,咽拭子樣本則高100倍;快速提取法提取核酸后檢測到的病毒載量均低于離心柱法,其中對含有病毒量較高的毒株檢測到的病毒載量低于離心柱法10倍,而對病毒量較少的咽拭子樣本,則低100倍;快速提取法穩(wěn)定性優(yōu)于離心柱法;提取后的核酸-80℃保存10 d后凍融復測,快速提取法核酸損失量大于離心柱法。67份離心柱提取法檢測陽性咽拭子樣本使用快速提取法提取核酸后檢測,兩種方法陽性符合率總計為92.54%,其中10~102拷貝/ml組,陽性符合率為76.92%,102~103拷貝/ml組,陽性符合率為92.59%,103拷貝/ml組,陽性符合率為100%。結(jié)論快速提取法具有穩(wěn)定性高、易于操作、不易污染的優(yōu)勢,適用于細胞培養(yǎng)液、雞胚培養(yǎng)液等病毒含量較高的大量樣本中流感病毒核酸提取,適于檢測樣本量大、人手不足、設(shè)備欠缺的基層實驗室使用;但-80℃凍融后核酸損失量較大,不宜反復凍融后使用;傳統(tǒng)的離心柱法對于病毒含量較少的咽拭子樣本及核酸需被反復凍融使用時具有優(yōu)勢。
【作者單位】: 北京市疾病預防控制中心 北京市預防醫(yī)學研究中心;中國疾病預防控制中心病毒病預防控制所;
【基金】:北京市衛(wèi)生系統(tǒng)高層次衛(wèi)生技術(shù)人才培養(yǎng)計劃項目(No.2013-3-098) 北京市優(yōu)秀人才培養(yǎng)資助青年拔尖個人項目(No.2014000021223ZK36) 北京市科技計劃課題(No.D141100003114001)~~
【分類號】:R373.13
【正文快照】: 作者單位:1.北京市疾病預防控制中心,北京市預防醫(yī)學研究中心,北京100013;2.中國疾病預防控制中心病毒病預防控制所,北京102206Corresponding author:YANG Peng,Email:yangpengcdc@163.com流行性感冒(流感)病毒是一種負鏈RNA病毒,具有易變性,其導致的流感傳播快,發(fā)病急,易引起

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 劉文;柯輝鵬;梁紅;;動植物總核酸提取試驗[J];仲愷農(nóng)業(yè)技術(shù)學院學報;2008年03期

2 張麗;楊蓮茹;吳紹強;;核酸提取方法的研究進展[J];中國動物檢疫;2011年12期

3 韓峰,宮倩紅,史曉,

本文編號:1138494


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