線粒體融合蛋白2低表達誘導(dǎo)絨毛滋養(yǎng)層細胞自噬的發(fā)生
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【摘要】:目的觀察線粒體融合蛋白2(Mfn2)si RNA轉(zhuǎn)染人絨毛滋養(yǎng)細胞后自噬的發(fā)生情況。方法構(gòu)建Mfn2 si RNA真核表達載體,電穿孔法將Mfn2 si RNA穩(wěn)定轉(zhuǎn)染人絨毛滋養(yǎng)層細胞并進行培養(yǎng),獲得Mfn2表達抑制的滋養(yǎng)層細胞。設(shè)立實驗組(轉(zhuǎn)染Mfn2 si RNA序列)、陰性轉(zhuǎn)染組(轉(zhuǎn)染Cy3 si RNA序列)、空白對照組(未轉(zhuǎn)染序列)。采用Western Blot檢測3組細胞轉(zhuǎn)染后Mfn2及自噬相關(guān)基因Beclin1和Atg5的表達水平;采用免疫熒光化學(xué)染色檢測LC3Ⅱ在3組絨毛滋養(yǎng)層細胞中的表達率。結(jié)果相對比陰性轉(zhuǎn)染組和空白對照組,實驗組Mfn2蛋白水平顯著降低,Beclin1和Atg5蛋白表達水平增加;免疫熒光化學(xué)染色顯示,LC3Ⅱ熒光光點表達率增加。結(jié)論 Mfn2低表達誘導(dǎo)Beclin1和Atg5的表達增加,進而誘導(dǎo)絨毛滋養(yǎng)層細胞自噬小體出現(xiàn)和自噬的發(fā)生,提示Mfn2可能通過調(diào)控絨毛滋養(yǎng)層細胞自噬參與胚胎發(fā)育。
【作者單位】: 華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院計劃生育研究所;華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院附屬同濟醫(yī)院婦產(chǎn)科;
【關(guān)鍵詞】: Mfn 滋養(yǎng)層細胞 LCⅡ Beclin Atg
【基金】:中央高校自主創(chuàng)新基金資助項目(2011TS134)
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 自噬是細胞自身利用溶酶體降解和回收細胞內(nèi)大分子物質(zhì)和受損細胞器形成膜泡的過程。正常的自噬過程是維持細胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定和細胞生命活動順利進行所必須的[1]。在機體產(chǎn)生自噬的過程中,線粒體的融合與分裂發(fā)揮著至關(guān)重要的作用[2]。線粒體融合蛋白2(Mfn2)是線粒體外膜上高度保
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【相似文獻】
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2 彭文,江森,戴e,
本文編號:1085329
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