本文關(guān)鍵詞：結(jié)核分枝桿菌Esx-1底物蛋白Rv3615c的原核表達及其免疫功能研究

  更多相關(guān)文章： Rvc 原核表達 免疫功能 全血IFN-γ分析試驗 結(jié)核分枝桿菌

【摘要】：目的:構(gòu)建結(jié)核分枝桿菌(M.tb)Esx-1底物蛋白Rv3615c的原核表達質(zhì)粒p ET30b-Rv3615c并在大腸桿菌BL21(DE3)中進行原核表達;以全血IFN-γ分析試驗(WBIA)檢測rRv3615c蛋白能否被淮南市M.tb感染者T細胞所識別;在小鼠模型中檢測其免疫原性。方法:以分子克隆技術(shù)構(gòu)建重組載體p ET30b-Rv3615c并表達、純化rRv3615c蛋白,以WBIA檢測rRv3615c抗原刺激淮南市M.tb感染者和未感染者外周血淋巴細胞產(chǎn)生的特異性IFN-γ水平。此外聯(lián)合佐劑SAS免疫C57BL/6小鼠,評價其體液免疫應(yīng)答和Th1型應(yīng)答水平。結(jié)果:成功構(gòu)建p ET30b-Rv3615c質(zhì)粒,SDS-PAGE和Western blot顯示其正確表達和純化。rRv3615c蛋白特異性刺激淮南市M.tb感染者淋巴細胞產(chǎn)生的IFN-γ濃度顯著高于健康對照者。Rv3615c/SAS誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生的IgG、IgG1、IgG2a以及Rv3615c1SAS誘導(dǎo)小鼠脾淋巴細胞分泌的特異性IFN-γ、TNF-α和IL-2,均顯著高于PBS組和SAS組,顯示rRv3615c可誘導(dǎo)趨向于Th1型免疫應(yīng)答。結(jié)論:Rv3615c可被淮南市M.tb感染者T細胞識別,具有較強的免疫原性,是用于結(jié)核病(TB)預(yù)防和診斷的潛力靶抗原。
【作者單位】： 安徽理工大學醫(yī)學院病原生物學與免疫學教研室;
【關(guān)鍵詞】： Rvc 原核表達 免疫功能 全血IFN-γ分析試驗 結(jié)核分枝桿菌
【分類號】：R378.91+1
【正文快照】： 卡介苗(Bacille calmette-Guerin,BCG)作為當前全球范圍內(nèi)唯一廣泛應(yīng)用于結(jié)核病(Tuberculosis,TB)預(yù)防的減毒活疫苗,盡管對嬰幼兒TB(尤其是結(jié)核性腦膜炎和粟粒性TB)預(yù)防效果較好,但卻受制于免疫保護期較短、對成人TB保護性不夠理想的缺陷[1,2]。因此,篩選具有高度免疫原性的、

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