本文關(guān)鍵詞：表皮干細(xì)胞向汗腺細(xì)胞分化的表型改變及其通路機(jī)制研究

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【摘要】：目的探討表皮干細(xì)胞(epidermal stem cells,ESCs)誘導(dǎo)分化為汗腺細(xì)胞(sweat gland cells,SGCs)過程中表型的改變及其通路的調(diào)控機(jī)制。方法取健康成人包皮,采用中性蛋白酶消化后高濃度Ⅳ型膠原黏附法分離培養(yǎng)獲得ESCs,行β_1整合素、角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)及p63免疫熒光染色法鑒定;取健康成人全層皮膚,采用Ⅱ型膠原酶消化法分離提取汗腺組織,體外增殖培養(yǎng)SGCs,行CK7、CK18、CK19和癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)免疫熒光法鑒定。取第2代ESCs分為4組:A組將ESCs及SGCs兩種細(xì)胞通過Ttranswell共培養(yǎng)系統(tǒng)共培養(yǎng),B組通過單純添加汗腺上清液培養(yǎng)ESCs,C組在A組基礎(chǔ)上加入濃度為60 ng/mL的EGF,D組在A組基礎(chǔ)上加入濃度為10 mmol/L的PD98059。分別通過倒置相差顯微鏡進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)ESCs表型陽性率及Western blot檢測(cè)分化過程中的信號(hào)通路機(jī)制。結(jié)果經(jīng)細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察及免疫熒光染色鑒定提示培養(yǎng)細(xì)胞為ESCs和SGCs。倒置相差顯微鏡觀察示,A、C、D組培養(yǎng)后細(xì)胞形態(tài)變化相似,9 d后細(xì)胞開始出現(xiàn)扁平多角形結(jié)構(gòu)改變;B組形態(tài)變化較慢培養(yǎng)12 d后與其他3組結(jié)構(gòu)相似。流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果示,與B組比較,A組Transwell共培養(yǎng)系統(tǒng)共培養(yǎng)后,ESCs的β_1整合素陽性率顯著下調(diào)、CEA陽性率顯著上調(diào)(P0.05);C組加入EGF可降低共培養(yǎng)系統(tǒng)中ESCs的β_1整合素下調(diào)和CEA上調(diào),D組加入PD98059可增強(qiáng)共培養(yǎng)系統(tǒng)中ESCs的β_1整合素下調(diào)和CEA上調(diào),A、C、D組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Western blot檢測(cè)示,4組均有較高水平細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(extracellular signal regulated kinase,ERK)表達(dá),但B組明顯低于其他3組(P0.05);磷酸化-ERK表達(dá)A組最高、C組最低,各組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論處于SGCs生長(zhǎng)環(huán)境中時(shí),通過Transwell共培養(yǎng)系統(tǒng)共培養(yǎng),ESCs可經(jīng)誘導(dǎo)分化為SGCs,其表型發(fā)生相應(yīng)改變;通過對(duì)絲裂原活化蛋白激酶/ERK通路的控制,可以調(diào)節(jié)ESCs的分化方向和程度。
【作者單位】： 解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院燒傷整形科;
【關(guān)鍵詞】： 皮膚 表皮干細(xì)胞 汗腺細(xì)胞 細(xì)胞分化 表型 信號(hào)通路
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 大面積深度燒傷創(chuàng)面愈合后汗腺缺失導(dǎo)致的體溫調(diào)節(jié)障礙,是亟待解決的嚴(yán)重影響患者生存質(zhì)量的問題。近年來干細(xì)胞與再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究的飛速發(fā)展,使得汗腺重建成為可能[1-2]。表皮干細(xì)胞(epi-dermal stem cells,ESCs)作為皮膚的特異性干細(xì)胞,具有包括向汗腺細(xì)胞(sweat gland cel

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1 記者 江卉;人造汗腺研究成功[N];湖北日?qǐng)?bào);2008年

2 張獻(xiàn)懷;體外培養(yǎng)汗腺細(xì)胞有發(fā)汗功能[N];健康報(bào);2009年

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