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《2000全國腫瘤學術大會論文集》2000年

免疫PCR新技術建立在腫瘤血清學診斷中的應用與融合蛋白的基因表達

任軍  

【摘要】：目的:本研究以胃癌單抗及抗原研究中取得的成果為基礎,利用細胞工程和基因工程技術,巧妙地將抗原抗體反應的特異性同 PCR 的敏感性相結合,創(chuàng)造性地構建成功單抗與重組核酸的的嵌合體分子,在國際上首創(chuàng)了適于胃癌、結腸及肝癌血清學診斷的免疫 PER 新技術,為腫瘤抗原的檢測提供了一種的方法。方法:第一,體外將全抗體分子同重組核酸連接,構建單抗一核酸嵌合體,該嵌合體分子保持了抗原本身的親和力活性,同時又可用做 PCR 擴增的模板;第二,制備了腫瘤單抗的單鏈抗體,包括胃癌單抗 MG7、CEA、 AFP,并同鏈親和素基因融合,構建了雙特異性融合基因表達系統(tǒng),擬表達既能與抗原分子結合又可和生物素分子結合的融合蛋白。結果:以免疫 PCR 技術檢測了胃癌細胞株 KAT0Ⅲ上胃癌抗原 MG7Ag 的表達,并同時用 ELISA 法進行平行對照,以判定免疫 PCH 技術檢測的敏感性。結果發(fā)現,ELISA 法需要每毫升含20萬個細胞分泌的抗原才能檢出陽性結果,而用免疫 PCR 法只要每毫升20個細胞便可得到陽性結果;胃癌免疫 PCR 技術在血清診斷中的價值及特異性檢測表明,胃癌198例,陽性164例,陽性率82.8%;獻血員236例,僅2例陽性,陽性率0.8%;良性胃病為潰瘍病178例,慢性胃炎118例,分別僅有6例及7例陽性,假陽性率分別為7.7%和5.9%;為了觀察免疫 PER 技術對人體其它腫瘤的診斷價值,選取了398例常見腫瘤進行了檢測,檢測結果為:胃癌(164/198,82.8%)食管癌(15/86,17. 4%),結腸癌(40/90,44.4%),肝癌(0/84,0%),卵巢癌(1/45,2.2%), 子宮癌(0/27,0%),肺癌(4/66,6.1%)。

【作者單位】：西安第四軍醫(yī)大學西京醫(yī)院腫瘤中心
【分類號】：R730.4
【正文快照】：

免疫PCR新技術建立在腫瘤血清學診斷中的應用與融合蛋白的基因表達@任軍$西安第四軍醫(yī)大學西京醫(yī)院腫瘤中心目的:本研究以胃癌單抗及抗原研究中取得的成果為基礎,利用細胞工程和基因工程技術,巧妙地將抗原抗體反應的特異性同 PCR 的敏感性相結合,創(chuàng)造性地構建成功單抗與重組

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