以黑果枸杞無菌苗的葉片為材料,對愈傷組織誘導(dǎo)及增殖培養(yǎng)的最佳激素組合進行篩選,通過研究不同初始接種量、碳源、光暗條件對懸浮培養(yǎng)體系的影響,確定最佳培養(yǎng)條件,并對懸浮細胞的生長特性進行監(jiān)測,建立黑果枸杞細胞懸浮培養(yǎng)體系。結(jié)果表明,葉片誘導(dǎo)愈傷的最佳激素組合是WPM+KT 0.5 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L+蔗糖20 g/L+瓊脂5.0 g/L,誘導(dǎo)率100%,且愈傷組織質(zhì)地疏松,生長快;最佳細胞懸浮培養(yǎng)條件是:細胞初始鮮重接種量1.5%,碳源為蔗糖,光照培養(yǎng)或弱光培養(yǎng);所建立的細胞懸浮系生長是"S"型曲線,培養(yǎng)第25 d,細胞生長量最大,細胞干重達到最大值10.1 g/L,是接種時的12.6倍。 

【文章來源】：基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2020,39(11)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

黑果枸杞葉片誘導(dǎo)

根據(jù)愈傷誘導(dǎo)及繼代培養(yǎng)的試驗結(jié)果，選擇繼代20 d左右、疏松型、一致性較強的的葉片愈傷組織進行細胞懸浮培養(yǎng)。初代懸浮細胞在2～4 d后愈傷組織逐漸分散，4～6 d培養(yǎng)液開始變濃，10～20 d細胞處于快速生長期，培養(yǎng)液更加濃稠(圖3A),21～25 d趨于穩(wěn)定，28～30 d后培養(yǎng)液逐漸變灰褐色(圖3B)，細胞衰老。初代培養(yǎng)的細胞狀態(tài)不穩(wěn)定，大團塊較多。去除較大細胞團塊的繼代1次的細胞分散更快，繼代2次之后狀態(tài)穩(wěn)定，獲得黑果枸杞懸浮培養(yǎng)細胞系。圖3 懸浮細胞培養(yǎng)

懸浮細胞培養(yǎng)

【參考文獻】：
期刊論文
[1]葡萄細胞懸浮培養(yǎng)體系的建立和優(yōu)化[J]. 王玲,李琰,代偉娜,嚴靜,張朝紅.  生物技術(shù)通報. 2018(08)
[2]基于諾麗葉片愈傷組織的細胞懸浮系的建立[J]. 張正雪,藍增全,吳田.  生物技術(shù)通報. 2018(05)
[3]楸樹胚性細胞懸浮系的建立和植株再生[J]. 高晗,陳發(fā)菊,王毅敏,梁宏偉.  基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2018(02)
[4]植物細胞懸浮培養(yǎng)中次生代謝產(chǎn)物積累的研究進展[J]. 陳月華,朱艷,張翔,秦民堅.  中國野生植物資源. 2016(03)
[5]珍稀瀕危植物銀鵲樹胚性細胞懸浮系的建立和植株再生[J]. 韋虹宇,梁宏偉,張博,李在留.  分子植物育種. 2016(03)
[6]長春花懸浮培養(yǎng)條件的優(yōu)化[J]. 廖禮佳,李祥會,楊軍,伍春蓮.  西華師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2013(03)
[7]藥用植物細胞懸浮培養(yǎng)體系生物轉(zhuǎn)化的研究進展[J]. 高超,儲智勇,黃寶康.  藥學(xué)服務(wù)與研究. 2013(03)
[8]藥用植物細胞懸浮培養(yǎng)的研究進展[J]. 王娟,高文遠,尹雙雙,劉輝,魏長龍.  中國中藥雜志. 2012(24)
[9]百里香愈傷組織的誘導(dǎo)及細胞懸浮培養(yǎng)體系的建立[J]. 徐世千,李曉東,張建國.  西北農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2011(10)
[10]新疆紫草細胞懸浮培養(yǎng)過程研究[J]. 葛鋒,王劍平,王曉東,趙兵,王玉春.  天然產(chǎn)物研究與開發(fā). 2010(03)



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