澳洲棉細(xì)菌人工染色體文庫(kù)構(gòu)建
發(fā)布時(shí)間:2021-11-24 05:12
攜帶大片段基因組DNA的細(xì)菌人工染色體(bacterial artificial chromosome, BAC)文庫(kù)是進(jìn)行基因組結(jié)構(gòu)與功能等相關(guān)研究的重要基因組資源。澳洲棉是二倍體野生棉,具有抗或耐棉蚜、抗黃萎病、抗干旱、增加衣分率、提高纖維成熟度的潛力,種子無(wú)腺體或植株有腺體等許多優(yōu)良性狀。本研究是在現(xiàn)有的野生棉二倍體和四倍體棉BAC文庫(kù)基礎(chǔ)上,以二倍體野生棉種澳洲棉為實(shí)驗(yàn)材料,提取澳洲棉幼嫩葉的DNA,經(jīng)過(guò)HindⅢ酶切片段化,克隆到pSMART BAC (HindⅢ)載體,構(gòu)建了澳洲棉的基因組細(xì)菌人工染色體(bacterial artificial chromosome, BAC)文庫(kù)。該文庫(kù)總共包含16 128個(gè)克。42個(gè)384孔板),平均插入的片段為120 kb,基因組覆蓋率約1.06倍。澳洲棉BAC文庫(kù)的構(gòu)建將為棉屬野生種質(zhì)資源的保存與利用積累重要基因組資源。
【文章來(lái)源】:分子植物育種. 2020,18(21)北大核心CSCD
【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)
【部分圖文】:
酶切片段的選擇
最佳酶切量的測(cè)定
對(duì)選擇的目的片段進(jìn)行電洗脫,回收其中的DNA,用已稀釋過(guò)濃度的λDNA標(biāo)準(zhǔn)液為對(duì)照,檢測(cè)回收的DNA濃度,據(jù)條帶亮度對(duì)比(圖4),得出回收的DNA濃度應(yīng)在于3~4 ng/μL之間,后續(xù)操作按3 ng/μL計(jì)算。圖2 最佳酶切量的測(cè)定
本文編號(hào):3515302
【文章來(lái)源】:分子植物育種. 2020,18(21)北大核心CSCD
【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)
【部分圖文】:
酶切片段的選擇
最佳酶切量的測(cè)定
對(duì)選擇的目的片段進(jìn)行電洗脫,回收其中的DNA,用已稀釋過(guò)濃度的λDNA標(biāo)準(zhǔn)液為對(duì)照,檢測(cè)回收的DNA濃度,據(jù)條帶亮度對(duì)比(圖4),得出回收的DNA濃度應(yīng)在于3~4 ng/μL之間,后續(xù)操作按3 ng/μL計(jì)算。圖2 最佳酶切量的測(cè)定
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