為建立和優(yōu)化特色藥食兩用植物黑老虎（Kadsura coccinea）的ISSR-PCR反應(yīng)體系和擴(kuò)增程序,通過正交和單因素試驗研究Mg²⁺、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶、模板DNA、退火溫度及循環(huán)次數(shù)等因素對黑老虎ISSR-PCR反應(yīng)體系擴(kuò)增效果的影響。結(jié)果表明,在20μL的反應(yīng)體系中,最佳擴(kuò)增條件為Mg²⁺濃度2.5mmol/L、dNTPs濃度0.1mmol/L、引物濃度0.6μmol/L、Taq DNA聚合酶用量1.50U、模板DNA用量45ng,退火溫度50.4℃,循環(huán)40次。這一優(yōu)化體系的建立可為深入開展黑老虎種質(zhì)資源遺傳多樣性研究奠定基礎(chǔ)。 

【文章來源】：廣西科學(xué). 2020,27(04)

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
0 引言
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 儀器及藥品
    1.3 方法
        1.3.1 黑老虎植物基因組DNA的提取
        1.3.2 ISSR-PCR反應(yīng)體系正交試驗
        1.3.3 ISSR-PCR反應(yīng)單因素試驗設(shè)計
        1.3.4 ISSR-PCR反應(yīng)程序的優(yōu)化
        1.3.5 ISSR反應(yīng)體系的驗證
2 結(jié)果與分析
    2.1 ISSR反應(yīng)體系正交試驗結(jié)果
    2.2 Mg2+濃度對ISSR?PCR擴(kuò)增效果的影響
    2.3 dNTPs濃度對ISSR?PCR擴(kuò)增效果的影響
    2.4 引物濃度對ISSR?PCR擴(kuò)增效果的影響
    2.5 Taq DNA聚合酶用量對ISSR?PCR擴(kuò)增效果的影響
    2.6 模板DNA用量對ISSR?PCR擴(kuò)增效果的影響
    2.7 退火溫度對ISSR?PCR擴(kuò)增效果的影響
    2.8 循環(huán)次數(shù)對ISSR?PCR擴(kuò)增效果的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號：3470789