本文利用TaqMan探針實時熒光定量PCR(qPCR)檢測技術(shù)對梅州地區(qū)疑似柑橘黃龍病樣品進行檢測,并與常規(guī)PCR檢測進行對比。結(jié)果表明,實時熒光定量PCR用于檢測柑橘黃龍病菌結(jié)果快速、準(zhǔn)確、可靠且無污染。采用2種方法對梯度稀釋的陽性樣本進行檢測發(fā)現(xiàn),實時熒光定量PCR的靈敏度較常規(guī)PCR更高,能夠檢出樣品中痕量的病原菌。本研究在梅州地區(qū)建立了以實時熒光定量PCR方法進行柑橘黃龍病疑似植株的檢測,可以為梅州地區(qū)提供更準(zhǔn)確、更靈敏、快速的黃龍病檢測技術(shù)。

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【部分圖文】：

圖1柑橘黃龍病PCR凝膠電泳圖譜

給常規(guī)PCR檢測發(fā)現(xiàn)，9個樣品在1167bp處擴增出特異性電泳條帶，陰性對照、空白對照在此位置無特異性擴增條帶；實時熒光定量PCR檢測發(fā)現(xiàn)，12個樣品的CT值≤35，即為黃龍病陽性，陰性對照、空白對照無CT值。對比檢測結(jié)果，只要實時熒光定量PCR檢測為陽性的樣品，常規(guī)PCR全....

圖2柑橘黃龍病實時熒光定量PCR檢測結(jié)果

圖1柑橘黃龍病PCR凝膠電泳圖譜2.3實時熒光定量PCR與常規(guī)PCR靈敏度對比

圖3實時熒光定量PCR與常規(guī)PCR的檢測靈敏度對比

本實驗室在梅州地區(qū)建立了柑橘黃龍病PCR快速檢測技術(shù)[6]，在檢測篩查過程中發(fā)現(xiàn)，同樣的植株，半年前檢測結(jié)果為陰性，在半年后的檢測中呈陽性，顯示常規(guī)PCR檢測技術(shù)對黃龍病感染初期的檢出率較低。因此，本研究建立了以實時熒光定量PCR方法進行柑橘黃龍病疑似植株的檢測，可以為梅州地區(qū)提....

本文編號：3910441