Cry1B對鱗翅目和鞘翅目昆蟲具有特異的殺蟲活性,但是目前對其研究相對較少。不斷發(fā)掘新的Cry1B蛋白并研究其殺蟲機制能夠為農(nóng)業(yè)害蟲的生物防治提供依據(jù)。前期鑒定出一種新的cry1Bd基因,將其命名為newcry1Bd。首先,將new-Cry1Bd蛋白與其他Cry1B家族蛋白進行親緣關系對比,確定其所屬分支,然后,把該基因克隆至pHT304載體,由cry1Ac基因啟動子和終止子調(diào)控其在Bt菌株中的表達;另外,為了研究new-Cry1Bd蛋白N端殺蟲活性區(qū)域的表達穩(wěn)定性,把其N端編碼序列單獨克隆至pHT304中,構(gòu)建類似的表達框架,用于蛋白表達分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn),new-Cry1Bd蛋白與Cry1Bd分支最為接近;序列比對結(jié)果顯示,new-Cry1Bd蛋白與Cry1Bd1蛋白僅相差3個氨基酸（S572、E1147和L1227）,其中,只有第一個差異位點位于N端活性區(qū)域,該蛋白及其N端部分（new-Cry1Bdhalf）均能在Bt菌株中表達,但其表達產(chǎn)物的可溶性差異較大,約有1/2的new-Cry1Bd蛋白表達產(chǎn)物可以溶解于Na₂CO₃溶液,而大部分n... 

【文章來源】：山西農(nóng)業(yè)科學. 2020,48(05)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 氨基酸多序列比對構(gòu)建進化樹
        1.2.2 表達載體的構(gòu)建
        1.2.3 2種蛋白的表達與可溶性分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 new-Cry1Bd蛋白親緣關系分析
    2.2 載體的構(gòu)建及鑒定
    2.3 2個蛋白的表達和可溶性分析
3 結(jié)論與討論



本文編號：3506551