本研究探討了馬鈴薯胰蛋白酶抑制劑(PTI)抑菌活性及其抑菌機(jī)理。采用濾紙片擴(kuò)散法測定抑菌圈直徑,微量二倍稀釋法測定最低抑菌濃度(MIC)、最低殺菌濃度(MBC),以此評價(jià)PTI的抑菌性。通過掃描電鏡觀察并測定胞膜通透性、胞膜完整性、胞內(nèi)活性氧含量及對細(xì)菌蛋白酶的抑制率等實(shí)驗(yàn),探討了PTI的抑菌機(jī)理。結(jié)果表明:PTI對枯草芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌和銅綠假單胞菌有較明顯的抑制作用,其抑菌圈直徑分別為12.56 mm、12.35 mm和11.76 mm,MIC為1.88～3.75 mg/mL,MBC均為3.75 mg/mL。PTI破壞了菌體細(xì)胞的形態(tài),導(dǎo)致菌懸液中相對電導(dǎo)率升高和核酸的泄漏,影響了細(xì)菌的膜通透性;通過熒光顯微鏡觀察,1 MIC的PTI使菌體胞膜的完整性遭到破壞并促進(jìn)胞內(nèi)ROS的產(chǎn)生,造成了菌體氧化損傷;PTI對菌體蛋白酶的活性表現(xiàn)出一定的抑制作用。通過實(shí)驗(yàn)得出PTI可能通過這種多靶點(diǎn)協(xié)同增效作用達(dá)到其抑菌效果。

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【部分圖文】：

圖2PTI對不同微生物的抑制作用Fig.2Inhibitoryactivityofpotatotrypsininhibitoragainstdifferentmicroorganisms

現(xiàn)代食品科技ModernFoodScienceandTechnology2020,Vol.36,No.12461.3.11數(shù)據(jù)分析以上實(shí)驗(yàn)均重復(fù)三次，數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（x±sd）來表示，用origin9.1軟件作圖和SPSS24.0軟件進(jìn)行方差和組間差異分析，以p<0.05作....

圖2PTI對不同微生物的抑制作用Fig.2Inhibitoryactivityofpotatotrypsininhibitoragainstdifferentmicroorganisms

現(xiàn)代食品科技ModernFoodScienceandTechnology2020,Vol.36,No.12461.3.11數(shù)據(jù)分析以上實(shí)驗(yàn)均重復(fù)三次，數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（x±sd）來表示，用origin9.1軟件作圖和SPSS24.0軟件進(jìn)行方差和組間差異分析，以p<0.05作....

圖3不同濃度PTI下細(xì)菌的生長曲線

現(xiàn)代食品科技ModernFoodScienceandTechnology2020,Vol.36,No.1247圖3不同濃度PTI下細(xì)菌的生長曲線Fig.3Bacterialgrowthcurvesunderdifferentconcentrationsofpotatotrypsi....

圖4PTI對供試菌形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

不平整；蠟樣芽孢桿菌細(xì)胞出現(xiàn)形態(tài)扭曲皺縮的現(xiàn)象；銅綠假單胞菌菌體表面外壁不全導(dǎo)致邊緣不清晰，多個(gè)菌體細(xì)胞粘成一團(tuán)甚至出現(xiàn)大量塌陷，有消融跡象，細(xì)菌原有形態(tài)遭到破壞。2.5細(xì)菌細(xì)胞膜通透性分析目前發(fā)現(xiàn)的絕大多抗菌蛋白和抗菌肽的抗菌機(jī)制基本都是以菌體細(xì)胞膜作為靶點(diǎn)，當(dāng)細(xì)胞膜受到破壞時(shí)....

本文編號：4026521