將植物乳桿菌D1501(Lactobacillus plantarum D1501)接種于黃漿水中,37 ℃靜置培養(yǎng)24h后制成酸漿。抑菌活性測定表明,該方法制備的酸漿對供試的革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌具有明顯的抗菌活性,對假絲酵母有弱的抑菌活性,但對釀酒酵母和2株霉菌沒有抑制作用。經中和及酶解實驗推測酸漿中的抑菌物質為細菌素。將經過30、10、3 kDa超濾分離得到的無細胞超濾液旋蒸濃縮定容后,采用RESOURCE-Q陰離子交換柱和300SB-C18反相層析柱依次純化,得到色譜純度細菌素物質,命名為Lp100。該細菌素經液相色譜-串聯(lián)質譜法分析,確定分子質量約為1 434.90 Da,氨基酸序列為MCCKVLLLLSRR。最終細菌素比活力為7 247.00 IU/mg,純化倍數(shù)為79.94 倍,回收率為1%。

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【部分圖文】：

圖1未發(fā)酵黃漿水及D1501酸漿對指示菌的的抑制作用

將菌株D1501發(fā)酵黃漿水制備的酸漿中和離心，并用0.22?μm微孔濾膜過濾除菌，得到無細胞上清液（D1501酸漿），對其進行抑菌活性檢測。圖1表明，D1501酸漿對指示菌大腸桿菌K-12和金黃色葡萄球菌ATCC6538有明顯抑菌活性，而未發(fā)酵黃漿水沒有檢測到明顯的抑菌作用，表明....

圖2RESOURCE-Q離子交換層析洗脫曲線

圖2為組分A(<3?kDa）經RESOURCE-Q陰離子交換層析的洗脫曲線，組分1為穿透峰，組分2、3、4為各洗脫峰。將各組分凍干濃縮至10?mL分別測定蛋白含量和抑菌活性。結果顯示穿透峰無抑菌活性，洗脫峰表現(xiàn)出不同的抑菌活性（表5），而組分2抑菌活性最高，因此挑選組分2進行....

圖3組分2的高效液相色譜圖

圖3為組分2經C18柱反相層析的高效液相色譜分離圖，將各峰對應的管8、9、10、11、14分開收集，分別命名為組分a～e，將各組分濃縮至5?mL分別測定各組分的蛋白含量和抑菌活性。由表6可知，除組分e外均具有抑菌活性，而組分c抑菌活性最大，因此挑選組分c進行下一步分離純化。2.....

圖4組分c的高效液相色譜圖

圖4為組分c經C18柱二次反相層析的高效液相色譜分離圖，管6、7為組分I，管8為組分II，管9為組分III，管10為組分IV，管11～13為組分V，將各組分濃縮至1?mL，分別測定蛋白含量和抑菌活性。如表7所示，組分II、III、IV均具有抑菌活性，而組分II的抑菌活性最大，因....

本文編號：3911002