傳統(tǒng)的示蹤微生物大腸桿菌(E.coli)、糞腸球菌屬(Enterococcus spp.)、雙歧桿菌(Bifidobacterium)、產(chǎn)氣莢膜菌（Clostridium perfringens）、普雷沃氏菌（Prevotella）、動(dòng)物腸道病毒等在水質(zhì)示蹤檢測(cè)中存在較多局限性，難以準(zhǔn)確示蹤水體污染程度。最新的研究表明：Faecalibacterium菌是人和動(dòng)物腸道中的優(yōu)勢(shì)菌群，不同宿主腸道內(nèi)的Faecalibacterium菌基因上存在顯著差異。根據(jù)這些基因差異可以區(qū)分糞便來源，可極大的彌補(bǔ)傳統(tǒng)糞便污染示蹤微生物的缺陷。 通過設(shè)計(jì)的一對(duì)通用引物FaU-F和FaU-R對(duì)人、豬、牛、羊、雞和鴨六種動(dòng)物糞便中的Faecalibacterium菌進(jìn)行了檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：選取的六種動(dòng)物的糞便基因組DNA樣品中都擴(kuò)增出了相同大小的目的片段，片段大小為500bp，說明了人和動(dòng)物腸道Faecalibacterium菌的廣泛存在的特性。 根據(jù)人腸道內(nèi)Faecalibacterium菌設(shè)計(jì)的一對(duì)引物HFB-F3和HFB-R5對(duì)人糞便基因組DNA進(jìn)行了多次PCR擴(kuò)增反應(yīng)，結(jié)果表明：最適PCR反應(yīng)條件為...

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.3F.prausnitzii菌株電子顯微照

.3F.prausnitzii菌株電子顯ngelectronmicrographofF.pFaecalibacterium菌的鑒Faecalibacteriumidentificat最適發(fā)酵代謝主要終產(chǎn)物主生37℃無氧呼吸丁酸鹽嚴(yán)厭cterium....

圖2.lA為西山坪地理位置圖

圖2.lA為西山坪地理位置圖Fig.2.1AinthemapisthemarkerofXiShanPingcounty驗(yàn)材料糞便樣品采集別采集人，雞，豬，狗，奶牛，鴨六種動(dòng)物的糞便樣品。目標(biāo)個(gè)體患消化系統(tǒng)疾病或使用抗生素類藥品。采集人員均佩戴統(tǒng)一的滅菌....

圖2.2基因組DNA瓊脂糖（0.5%）電泳Fig.2.2Agarose(0.5%)electrophoresisresultsofextractinggenomeDNAbykit10kbp

移液槍來去除瓊脂糖凝膠中的氣泡，.0cm的位置處插入樣品梳子；糖倒入膠槽中，凝膠厚度約為5mm拔掉樣品梳子，將膠轉(zhuǎn)移到電泳槽中泳緩沖液，浸沒膠面1mm；取PCR擴(kuò)增產(chǎn)物3μL，注入到點(diǎn)樣孔源，設(shè)置適當(dāng)參數(shù)進(jìn)行電泳。觀察藍(lán)色目的條帶，然后再凝膠成像系統(tǒng)GSG....

圖2.4Faecalibacterium菌通用性引物對(duì)六種動(dòng)物糞便基因組DNA擴(kuò)增結(jié)果

ecalibacterium菌通用性引物對(duì)六種動(dòng)物腸道Faecalibacterium菌1－雞，2－鴨，3－豬，4－狗，5－牛，6－人，M，DL2000DNeresultofusingFaecalibacteriumuniversalprimertoampl....

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