發(fā)布時間：2023-03-11 23:46

　　堆肥技術已經(jīng)在農(nóng)業(yè)廢物處理方面得到了廣泛的應用，并在一定程度上使農(nóng)業(yè)固體廢物減量化、無害化、資源化，但是木質(zhì)素的降解效率低仍然是一個亟待解決的問題，放線菌對木質(zhì)素的降解有著不容忽視的作用，所以，研究放線菌種群與堆肥過程中物化參數(shù)的對應關系具有重要的實際意義。本研究從農(nóng)業(yè)固體廢物堆肥樣品中提取總DNA，采用放線菌特異性引物F243/R1378進行PCR擴增，再以擴增的產(chǎn)物為模板，采用引物GC-F984/R1378進行第二輪擴增獲得適合DGGE的DNA片段，采用DGGE技術對獲得的放線菌16SrDNA進行電泳分離。應用QuantityOne2.0軟件處理放線菌的DGGE指紋圖譜獲得農(nóng)業(yè)廢物垃圾堆肥過程中放線菌種群多樣性的信息。DGGE圖譜顯示，在堆肥初期放線菌種類迅速增加；堆肥中期放線菌種類基本保持不變，優(yōu)勢菌明顯；堆肥后期，放線菌種類逐漸增多，種群均勻度較高，各種群豐度差異不大。 采用Real-timeqPCR對放線菌數(shù)量進行監(jiān)測，所用引物為F984/R1378。結果表明，放線菌在農(nóng)業(yè)固體廢物堆肥過程中，在數(shù)量上呈“升高-降低-升高”的規(guī)律。 為了檢驗哪些堆肥物化參數(shù)或組合能夠在一定程度...

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 農(nóng)業(yè)廢物概述
    1.2 堆肥化
        1.2.1 堆肥化原理
        1.2.2 堆肥工藝流程
        1.2.3 堆肥中微生物的變化
    1.3 PCR-DGGE和Real-timeqPCR技術
        1.3.1 PCR技術
        1.3.2 DGGE技術
        1.3.3 PCR-DGGE的應用
        1.3.4 Real-timeqPCR技術原理與數(shù)學原理
        1.3.5 qPCR技術的發(fā)展與應用
    1.4 放線菌的研究進展
    1.5 多元分析方法
        1.5.1 排序分析
        1.5.2 排序模型
        1.5.3 回歸分析
        1.5.4 主成分分析(PCA)
        1.5.5 冗余分析(RDA)
        1.5.6 除趨勢對應分析(DCA)
        1.5.7 典范對應分析(CCA)
    1.6 本課題主要研究內(nèi)容及意義
第2章 農(nóng)業(yè)廢物好氧堆肥中物化參數(shù)的變化
    2.1 實驗材料
    2.2 實驗儀器設備、試劑
        2.2.1 儀器設備
        2.2.2 實驗器皿及試劑
    2.3 實驗方法
        2.3.1 實驗準備
        2.3.2 理化參數(shù)的測定方法
    2.4 結果與討論
        2.4.1 環(huán)境溫度與堆體溫度
        2.4.2 pH與C/N
        2.4.3 含水率與WSC
        2.4.4 水溶性硝態(tài)氮和銨態(tài)氮
    2.5 小結
第3章 物化參數(shù)對放線菌群落結構的影響
    3.1 儀器設備
    3.2 主要試劑
    3.3 實驗方法
        3.3.1 堆肥樣品的預處理
        3.3.2 堆肥樣品DNA的提取
        3.3.3 DNA的純化
        3.3.4 瓊脂糖凝膠電泳
        3.3.5 PCR擴增
        3.3.6 DGGE
        3.3.7 Real-timeqPCR
    3.4 數(shù)據(jù)處理方法
    3.5 DNA提取和PCR-DGGE效果
        3.5.1 DNA提取效果檢測
        3.5.2 PCR結果
        3.5.3 DGGE指紋圖譜
    3.6 Real-timeqPCR結果
    3.7 冗余分析(RDA1)
        3.7.1 基于所有物化參數(shù)的RDA分析
        3.7.2 手動選擇RDA(RDA2)
        3.7.3 回歸分析
    3.8 討論
    3.9 小結
第4章 結論與展望
參考文獻
附錄A 攻讀碩士期間發(fā)表的學術論文目錄
致謝



本文編號：3760496