第一部分NLRP3炎性小體和焦亡在心肌缺血再灌注微循環(huán)障礙中的作用[目的]探討NLRP3炎性小體和焦亡在心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞和心肌組織中的作用。[方法]體外實(shí)驗(yàn):利用心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞株(Cardiac microvascular endothelial cells,CMECs)建立缺氧/復(fù)氧模型,模擬缺血再灌注過程。在復(fù)氧前給予NLRP3抑制劑MCC950或caspase-4抑制劑VX-765預(yù)處理CMECs。隨后,把培養(yǎng)的CMECs隨機(jī)分為對(duì)照組(normoxia組)、缺氧/復(fù)氧組(H/R組)、缺氧/復(fù)氧+MCC950 組(H/R+MCC950 組)、缺氧/復(fù)氧+VX-765 組(H/R+VX-765 組)。使用實(shí)時(shí)定量PCR反應(yīng)(Quantitative Real-time PCR,RT-PCR)檢測(cè)缺氧/復(fù)氧對(duì)CMECs中NLRP3和IL-1β mRNA水平的影響;采用蛋白質(zhì)免疫印跡方法(western blot)檢測(cè) CMECs 不同組別中 NLRP3、caspase-1、caspase-4、IL-1β 和 GSDMD表達(dá)的變化;MCC950預(yù)處理后對(duì)H/R誘導(dǎo)的CMECs中N...

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１．２：不同缺氧／復(fù)氧（Ｈ／Ｒ）時(shí)間后心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞中ＮＬＲＰ３ｍＲＮＡ的??

ｇ?１０－，?＊??Ｉ?８－?ｇ?＊??Ｈ／Ｒ??圖１．２：不同缺氧／復(fù)氧（Ｈ／Ｒ）時(shí)間后心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞中ＮＬＲＰ３ｍＲＮＡ的??表達(dá)量。數(shù)據(jù)表示為均值士ＳＤ?（ｊｆ士ＳＤ，ｎ＝３）。＞＜０．０５ｖ＆對(duì)照組。??Ｆｉｇｕｒｅ．?１．２．?Ｔｈｅ?ｌｅｖｅｌ?ｏｆ?ＮＬＲＰ３?....

圖１．３：?Ｈ／Ｒ誘導(dǎo)心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞中ＮＬＲＰ３活化和ＩＬ－ｉｐ的生成

ｇ?１０－，?＊??Ｉ?８－?ｇ?＊??Ｈ／Ｒ??圖１．２：不同缺氧／復(fù)氧（Ｈ／Ｒ）時(shí)間后心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞中ＮＬＲＰ３ｍＲＮＡ的??表達(dá)量。數(shù)據(jù)表示為均值士ＳＤ?（ｊｆ士ＳＤ，ｎ＝３）。＞＜０．０５ｖ＆對(duì)照組。??Ｆｉｇｕｒｅ．?１．２．?Ｔｈｅ?ｌｅｖｅｌ?ｏｆ?ＮＬＲＰ３?....

圖１．５：?ＭＣＣ９５０抑制Ｈ／Ｒ誘導(dǎo)的心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞中ＮＬＲＰ３活化和ＩＬ－ｌｐ的??

０．６－．?０．８－ｉ??★?★??■？Ｃ?Ｉ?．Ｓ?〇?６－??＾?０．４－?｜??＂ｊｎｌＪｉｉ?�。停�??＾?＃?Ｎ?令??Ｈ／Ｒ＋Ｎ１ＣＣ９５０?（ｆｉＭ）?Ｈ／Ｒ＋ＭＣＣ９５０?（ＭＭ）??圖１．５：?ＭＣＣ９５０抑制Ｈ／Ｒ誘導(dǎo)的心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞中ＮＬＲＰ３活化和ＩＬ....

圖２．１：?Ｈ／Ｒ誘導(dǎo)心臟微血管內(nèi)皮ＮＬＲＰ３炎性小體活化和細(xì)胞焦亡

?－?＊??Ｈ／Ｒ?２／２ｈ?＇％?°?３￣??ＣＯ??ＮＬＲＰ３?１?ｌＯｋＤ?＾?０?２?＇！??Ｃａｓｐａｓｅ－１?聲??—?２０ｋＤ?，?〇叫??ＧＳＤＭＯ?３１ｋＤ?ｏ．ｏ?Ｉ?■?？—Ｉ￣—??????■??Ｐ－ａｃｔｉｎ?４２ｋＤ??０．８］?°－６ｉ??＊?——?....

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