代謝綜合征(Metabolic Syndrome,MS)是機體內(nèi)多種營養(yǎng)成分發(fā)生代謝紊亂的一組疾病癥候群。MS與心腦血管疾病、2型糖尿病、癌癥等慢性疾病密切相關,是糖尿病、心腦血管疾病等高發(fā)病率的基礎。MS的發(fā)病機理從本質(zhì)上認為是長期慢性炎癥的作用,因此,研究炎癥在機體和細胞內(nèi)的作用機理,抑制炎癥的發(fā)生和發(fā)展,對于預防和改善MS等心腦血管疾病具有積極的理論指導意義。石榴含有多種的營養(yǎng)成分,多酚類和黃酮類化合物的種類和含量都很豐富,而石榴皮中的多酚種類繁多且在石榴各部位中含量最高,這些豐富的植物化學物使得石榴皮提取物具有許多生物活性。研究表明,石榴及其提取物具有抗糖尿病、抗氧化、抗菌、抗肥胖、抗癌、降血脂等功效。在炎癥方面,已經(jīng)有研究發(fā)現(xiàn)石榴皮提取物具有抑制某些炎性介質(zhì)和促炎細胞因子分泌的作用,具有一定的抗炎效果,但是其作用機理和主要活性成分尚不清楚。因此,石榴皮多酚(Pomegranate peel polyphenols,PPPs)及其主要成分對炎癥的抑制效果及其作用的分子機制有必要進一步深入研究。本論文從體外試驗和體內(nèi)試驗兩方面入手,首先用脂多糖(lipopolysaccharid...

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【學位級別】：博士

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摘要
Abstract
縮寫詞中英文對照表
第1章 文獻綜述
    1.1 石榴皮多酚概述
        1.1.1 石榴簡介
        1.1.2 石榴皮多酚及其主要活性成分
        1.1.3 石榴皮多酚的生物活性
    1.2 炎癥反應
        1.2.1 炎癥反應進程
        1.2.2 巨噬細胞
        1.2.3 TLR4與LPS
        1.2.4 炎性介質(zhì)和促炎細胞因子
        1.2.5 NF-κB通路
        1.2.6 MAPK通路
    1.3 研究意義與研究內(nèi)容
        1.3.1 研究思路及意義
        1.3.2 研究內(nèi)容與技術(shù)路線
第2章 PPPs對LPS誘導的RAW264.7巨噬細胞炎癥反應的調(diào)控
    2.1 材料和儀器
        2.1.1 試驗材料
        2.1.2 主要試劑及耗材
        2.1.3 儀器和設備
        2.1.4 試劑配制
    2.2 試驗方法
        2.2.1 石榴皮多酚純化物的HPLC分析
        2.2.2 細胞培養(yǎng)
        2.2.3 PPPs對RAW264.7巨噬細胞毒性的測定
        2.2.4 PPPs對RAW264.7巨噬細胞增殖的影響
        2.2.5 試驗分組及處理
        2.2.6 PPPs對巨噬細胞ROS生成的影響
        2.2.7 PPPs對巨噬細胞炎癥因子分泌的影響
        2.2.8 PPPs對巨噬細胞促炎因子和炎性介質(zhì)mRNA表達的影響
        2.2.9 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 PPPs組成成分的HPLC分析
        2.3.2 PPPs對巨噬細胞活力的影響
        2.3.3 PPPs對LPS誘導巨噬細胞ROS生成的影響
        2.3.4 PPPs對LPS誘導巨噬細胞促炎因子mRNA表達的影響
        2.3.5 PPPs對促炎細胞因子分泌的影響
        2.3.6 PPPs對炎性介質(zhì)NO/PGE2分泌和iNOS/COX-2 mRNA表達影響
    2.4 討論
    2.5 本章小結(jié)
第3章 PPPs對LPS誘導的RAW264.7巨噬細胞炎癥反應調(diào)控的分子機制
    3.1 材料和儀器
        3.1.1 試驗材料
        3.1.2 主要試劑及耗材
        3.1.3 儀器和設備
        3.1.4 試劑配制
    3.2 試驗方法
        3.2.1 試驗分組
        3.2.2 PPPs對LPS誘導巨噬細胞TLR4和NF-κB mRNA表達的影響
        3.2.3 PPPs對TLR4受體蛋白表達的影響
        3.2.4 PPPs對NF-κB通路的影響
        3.2.5 PPPs對LPS激活巨噬細胞MAPK通路的影響
        3.2.6 Western blot法檢測巨噬細胞總蛋白、核蛋白和胞漿蛋白
        3.2.7 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 LPS作用時間對巨噬細胞TLR4和NF-κB mRNA表達的影響
        3.3.2 PPPs對LPS誘導巨噬細胞TLR4表達的影響
        3.3.3 PPPs對LPS激活巨噬細胞NF-κB通路的影響
        3.3.4 PPPs對LPS激活巨噬細胞MAPK通路的影響
    3.4 討論
    3.5 本章小結(jié)
第4章 PPPs對高糖高脂誘導的SD大鼠代謝綜合征干預研究
    4.1 材料和儀器
        4.1.1 試驗材料
        4.1.2 實驗動物及飼料
        4.1.3 主要試劑及耗材
        4.1.4 儀器和設備
        4.1.5 試劑配制
    4.2 試驗方法
        4.2.1 實驗動物分組及處理
        4.2.2 組織標本采集
        4.2.3 體重、攝食量及肝重指數(shù)測定
        4.2.4 大鼠血清生化指標的測定
        4.2.5 大鼠肝臟TC、TG的測定
        4.2.6 大鼠肝臟中相關炎性指標的測定
        4.2.7 大鼠血清中相關炎性指標的測定
        4.2.8 大鼠肝臟病理學檢測
        4.2.9 大鼠肝臟相關炎性因子基因表達的測定
        4.2.10 大鼠肝臟炎癥通路相關蛋白的Western blot檢測
        4.2.11 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 PPPs對高糖高脂喂養(yǎng)的大鼠體重和攝食量的影響
        4.3.2 PPPs對高糖高脂喂養(yǎng)的大鼠血脂的影響
        4.3.3 PPPs對高糖高脂喂養(yǎng)的大鼠肝脂和肝重指數(shù)的影響
        4.3.4 PPPs對高糖高脂喂養(yǎng)的大鼠血糖、轉(zhuǎn)氨酶和FFA的影響
        4.3.5 PPPs對高糖高脂喂養(yǎng)的大鼠血清CRP、肝臟MPO的影響
        4.3.6 SD大鼠肝臟的外觀變化及病理學改變
        4.3.7 PPPs對高糖高脂喂養(yǎng)的大鼠血清及肝臟中細胞炎癥因子分泌的影響
        4.3.8 對肝臟中炎性介質(zhì)和促炎細胞因子的基因表達影響
        4.3.9 PPPs對高糖高脂喂養(yǎng)的大鼠NF-κB-MAPK炎癥通路的影響
    4.4 討論
    4.5 本章小結(jié)
第5章 全文結(jié)論
    5.1 全文結(jié)論
    5.2 本論文的主要創(chuàng)新點
    5.3 論文的不足及展望
參考文獻
致謝
攻讀博士學位期間研究成果



本文編號：3859700