XAB2(Xeroderma pigmentosum group A-binding protein 2,著色性干皮病組A結合蛋白2)是2000年首次發(fā)現(xiàn)的一個高度保守的重要的多功能基因,參與了轉錄,轉錄偶聯(lián)的DNA修復,pre-mRNA的剪接及同源重組修復等多個重要生命過程的調(diào)控,XAB2對小鼠的胚胎發(fā)育同樣至關重要,敲除XAB2導致小鼠胚胎致死。本實驗室的前期工作發(fā)現(xiàn)XAB2能夠結合在影響天然無內(nèi)含子mRNA出核的順式作用元件上,敲低XAB2能夠明顯抑制mRNA的出核,表明XAB2也參與了mRNA出核調(diào)控。盡管XAB2蛋白在基因表達調(diào)控中發(fā)揮了重要的功能,但其下游靶基因以及在人類細胞中發(fā)揮的生理功能目前仍不是很清楚,有待進一步發(fā)現(xiàn)和研究。為此,我們首先在HeLa細胞中利用shRNA敲低XAB2,基因芯片分析顯示XAB2敲低導致調(diào)控細胞周期尤其是有絲分裂期相關基因(如著絲粒蛋白CENPE)的表達發(fā)生異常,提示XAB2有可能通過調(diào)控CENPE表達影響有絲分裂。有絲分裂是細胞周期的重要組成部分,它能夠保證細胞分裂過程中攜帶遺傳信息的染色體的精確分離,從而維持了親代與子代之間遺傳的穩(wěn)定性,...

【文章頁數(shù)】：140 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一部分 XAB2下調(diào)通過抑制CENPE表達影響有絲分裂的機制研究
    前言
    材料和方法
        1.實驗材料與儀器
        2.實驗方法
    結果
        1.基因芯片分析顯示XAB2敲低導致調(diào)控細胞周期相關基因表達異常???
        2.XAB2敲低造成有絲分裂阻滯??
        3.XAB2敲低促進有絲分裂災難與細胞死亡??
        4.XAB2敲低導致染色體排列與分離異常??
        5.XAB2敲低導致紡錘體極、細胞核形態(tài)及微管組裝異常??
        6.XAB2敲低促進細胞DNA損傷??
        7.XAB2敲低通過下調(diào)CENPE表達影響有絲分裂??
        8.XAB2在轉錄水平調(diào)控CENPE的表達??
    討論
    小結
    參考文獻
第二部分 XAB2下調(diào)通過抑制POLR2A表達影響轉錄的機制研究
    前言
    材料和方法
        1.實驗材料與儀器
        2.實驗方法
    結果
        1.XAB2敲低導致POLR2A下調(diào)及新生RNA減少?
        2.XAB2敲低導致POLR2A mRNA先于蛋白下調(diào)且mRNA的 下調(diào)不依賴于轉錄
        3.XAB2敲低導致嚴重的POLR2A剪接損傷?
        4.剪接抑制劑madrasin導致POLR2A表達及轉錄活性下降
        5.抑制翻譯或敲低Dom34 能夠恢復POLR2A的表達??
        6.XAB2與剪接體組分相互作用共同維持POLR2A的表達?…
        7.XAB2通過2-4及11-12號TPR結構域與SNW1 作用維持POLR2A的表達??
    討論
    小結
    參考文獻
總結與展望
綜述 轉錄與剪接研究進展
    參考文獻
攻讀學位期間發(fā)表論文情況
致謝



本文編號：3848728