癌癥已成為全球第二大人類致死病因。然而,大多數(shù)常規(guī)化學治療仍然存在嚴重的副作用。近幾十年來,工程納米治療劑的開發(fā)和應用在癌癥治療等方面取得了顯著進展。隨著對腫瘤微環(huán)境和材料科學的深入了解,能夠響應各種內、外部刺激源,按需釋放有效載荷的智能響應型納米藥物載體成為新一代納米藥物運輸體系的新工程策略�；谥悄芗{米藥物體系的優(yōu)異性,本論文圍繞完善功能化納米載體設計,提高腫瘤治療效果以及減少毒副作用這一目標,選擇了具有良好生物相容性的生物大分子牛血清白蛋白、紅細胞膜以及天然葡萄糖氧化酶(GOx)為納米載體,設計了具有p H和谷胱甘肽(GSH)雙重響應、光觸發(fā)釋放以及酶催化響應的三種納米藥物遞送系統(tǒng),用于藥物在腫瘤部位的定點和響應性釋放,實現(xiàn)了腫瘤靶向、實時跟蹤、多功能治療等作用。主要研究工作如下:(1)首先介紹了刺激響應型納米藥物遞送系統(tǒng)在腫瘤治療中的發(fā)展歷程及現(xiàn)狀,并在此基礎上提出了工作設想。第二章,為了提高納米藥物在腫瘤部位的高效遞送,我們制備了“動態(tài)共價靶向”的納米系統(tǒng)用于靶標處的響應性藥物釋放。在受體介導的內吞作用下納米系統(tǒng)實現(xiàn)細胞內化后,在細胞內還原和酸性環(huán)境下解離成陽離子白蛋白,實現(xiàn)...

【文章頁數(shù)】：142 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 內源性刺激響應型納米藥物遞送系統(tǒng)
        1.1.1 pH響應的藥物遞送
        1.1.2 氧化還原響應的藥物遞送
        1.1.3 酶響應的藥物遞送
        1.1.4 葡萄糖響應的藥物遞送
        1.1.5 ATP響應的藥物遞送
    1.2 外源性刺激響應型納米藥物遞送系統(tǒng)
        1.2.1 熱敏感的藥物遞送
        1.2.2 磁響應的藥物遞送
        1.2.3 超聲響應的藥物遞送
    1.3 選題意義和設計思路
    1.4 論文創(chuàng)新點
第二章 具有pH/GSH雙重響應的白蛋白智能納米系統(tǒng)的設計及其在腫瘤治療中的應用
    2.1 引言
    2.2 實驗儀器及試劑
        2.2.1 實驗儀器
        2.2.2 實驗試劑
    2.3 實驗方法
        2.3.1 D/R@BSA-R的合成
        2.3.2 D/R@BSA-R的形貌與表征
        2.3.3 體外DOX釋放實驗
        2.3.4 細胞培養(yǎng)
        2.3.5 體外細胞毒性測試
        2.3.6 體外細胞攝取實驗
        2.3.7 過量RGD競爭實驗
        2.3.8 D/R@BSA-R在細胞內定位
        2.3.9 D/R@BSA-R的吸收通路
        2.3.10 細胞凋亡檢測
        2.3.11 體外siRNA轉染效率
        2.3.12 細胞遷移實驗
        2.3.13 細胞侵襲實驗
        2.3.14 荷瘤裸鼠模型的建立及活體成像實驗
        2.3.15 體內抗腫瘤評價
        2.3.16 H&E染色
        2.3.17 免疫組化分析
        2.3.18 血液生化指標分析
        2.3.19 核磁共振成像分析
        2.3.20 統(tǒng)計學分析
    2.4 結果與討論
        2.4.1 D/R@BSA-R的制備與表征
        2.4.2 D/R@BSA-R的刺激響應性
        2.4.3 細胞攝取和體外控制釋放。
        2.4.4 基因沉默和癌細胞遷移和侵襲的抑制。
        2.4.5 D/R@BSA-R體內腫瘤靶向能力評估
        2.4.6 D/R@BSA-R體內抗腫瘤實驗
        2.4.7 D/R@BSA-R體內毒性評價
    2.5 本章小結
第三章 光觸發(fā)仿生紅細胞膜納米系統(tǒng)的制備及其聯(lián)合抗腫瘤研究
    3.1 引言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 實驗儀器
        3.2.2 實驗試劑
    3.3 實驗方法
        3.3.1 羧基修飾的白蛋白(aBSA)
        3.3.2 載藥蛋白納米粒子的制備
        3.3.3 靶向配體的制備(c RGD-PEG-DSPE)
        3.3.4 RBC的制備
        3.3.5 R-RBC@BPt I的制備
        3.3.6 D/R@BSA-R的形貌與表征
        3.3.7 體外Pt釋放實驗
        3.3.8 單線態(tài)氧的檢測
        3.3.9 細胞培養(yǎng)
        3.3.10 體外細胞毒性測試
        3.3.11 細胞凋亡檢測
        3.3.12 活死細胞染色實驗
        3.3.13 體外細胞攝取
        3.3.14 R-RBC@BPt I在細胞內定位
        3.3.15 免疫逃逸實驗
        3.3.16 過量RGD競爭實驗
        3.3.17 細胞內活性氧檢測
        3.3.18 腫瘤球模型的建立
        3.3.19 B16F10荷瘤小鼠模型的建立及體內藥代動力學和分布
        3.3.20 R-RBC@BPt I體內抗腫瘤評價
        3.3.21 H&E染色和免疫組化分析
        3.3.22 血液生化指標分析
        3.3.23 MRI分析
        3.3.24 肺轉移模型的建立和肺轉移抑制
        3.3.25 統(tǒng)計學分析
    3.4 結果與討論
        3.4.1 R-RBC@BPt I的制備與表征
        3.4.2 R-RBC@BPt I的免疫逃逸評價
        3.4.3 R-RBC@BPt I的體外毒性評價
        3.4.4 R-RBC@BPt I的細胞攝取
        3.4.5 R-RBC@BPt I對 B16F10 細胞的抗凋亡機制
        3.4.6 R-RBC@BPt I在 B16F10 腫瘤球體中的滲透
        3.4.7 R-RBC@BPt I在荷瘤小鼠中的體內分布
        3.4.8 R-RBC@BPt I體內抗腫瘤及肺轉移抑制實驗
        3.4.9 R-RBC@BPt I體內毒性評價
    3.5 本章小結
第四章 二酶合一的仿生級聯(lián)遞送系統(tǒng)用于腫瘤深度滲透和特異性治療
    4.1 引言
    4.2 實驗部分
        4.2.1 實驗儀器
        4.2.2 實驗試劑
    4.3 實驗方法
        4.3.1 GOx-Fe的制備
        4.3.2 Angiopep-2-PEG-DSPE的制備
        4.3.3 RBC的提取
        4.3.4 GOx-Fe@RI的制備
        4.3.5 GOx-Fe@RI-A的制備
        4.3.6 體外Fe2+的釋放
        4.3.7 酶動力學反應
        4.3.8 GOx-Fe@RI-A中·OH的產(chǎn)生
        4.3.9 細胞培養(yǎng)
        4.3.10 體外細胞毒性測試
        4.3.11 活死細胞染色實驗
        4.3.12 細胞內活性氧檢測
        4.3.13 腫瘤球模型的建立
        4.3.14 C6荷瘤小鼠模型的建立及體內藥代動力學
        4.3.15 GOx-Fe@RI-A體內抗腫瘤評價
        4.3.16 H&E染色和免疫組化分析
        4.3.17 血液生化指標分析
        4.3.18 統(tǒng)計學分析
    4.4 實驗結果與討論
        4.4.1 GOx-Fe@RI-A的制備與表征
        4.4.2 GOx-Fe@RI-A的級聯(lián)催化性能
        4.4.3 GOx-Fe@RI-A的體外細胞毒性
        4.4.4 GOx-Fe@RI-A在腫瘤球中的滲透
        4.4.5 GOx-Fe@RI-A的藥代動力學研究
        4.4.6 GOx-Fe@RI-A的體內熒光成像
        4.4.7 GOx-Fe@RI-A的體內抗腫瘤實驗
        4.4.8 GOx-Fe@RI-A的體內毒性評價
    4.5 本章小結
第五章 結論與展望
參考文獻
縮略詞表
攻讀學位期間主要科研成果
致謝



本文編號：3810434