目的:通過動物實(shí)驗(yàn),觀察中藥復(fù)方冠心康改善ERK5-MKO/LDLR^-/-小鼠的動脈粥樣硬化斑塊和巨噬細(xì)胞胞葬作用相關(guān)信號分子的表達(dá)情況,特別是從ERK5信號通路調(diào)控巨噬細(xì)胞胞葬作用來探討冠心康抗動脈粥樣硬化的可能機(jī)制。方法:(1)ERK5-MKO/LDLR^-/-動脈粥樣硬化小鼠模型評價采用ERK5-MKO/LDLR^-/-小鼠,高脂飲食法喂養(yǎng)24周,建立ERK5-MKO/LDLR^-/-動脈粥樣硬化小鼠模型。通過分析小鼠的體重、血脂水平和主動脈病理形態(tài)等來評價小鼠模型。(2)組織病理檢測為了檢測各種干預(yù)措施對動脈粥樣硬化斑塊大小和易損性的影響,取小鼠主動脈根進(jìn)行如下檢測:H&E染色檢測斑塊大小,油紅O染色檢測斑塊脂質(zhì)含量,Masson染色檢測膠原蛋白含量,免疫組化染色檢測斑塊巨噬細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞含量,免疫熒光染色檢測凋亡細(xì)胞含量。(3)實(shí)時定量PCR和Western blot為了進(jìn)一步探討各種干預(yù)措施調(diào)控巨噬細(xì)胞胞葬功能的作用機(jī)制,用RT-q PCR和Western blot技術(shù)檢測小鼠主動脈...

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【學(xué)位級別】：博士

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中文摘要
ABSTRACT
引言
第一部分 ERK5基因?qū)用}粥樣硬化小鼠巨噬細(xì)胞胞葬作用的影響
    1.實(shí)驗(yàn)材料
        1.1. 實(shí)驗(yàn)動物
        1.2. 主要實(shí)驗(yàn)試劑、耗材
        1.3. 主要儀器和耗材
    2.實(shí)驗(yàn)方法
        2.1. 小鼠基因型鑒定方法
        2.2. 小鼠AS斑塊模型的建立方法
        2.3. 取材和組織保存
        2.4. 小鼠的一般情況及外周血脂水平的檢測
        2.5. 小鼠AS主動脈根晚期斑塊病理學(xué)的檢測
        2.6. Western blot檢測各組主動脈上巨噬細(xì)胞胞葬作用相關(guān)信號分子的蛋白表達(dá)量
        2.7. TRIzol法提取總RNA、反轉(zhuǎn)錄和實(shí)時定量PCR
        2.8. 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1. 小鼠基因型的鑒定結(jié)果
        3.2. ERK5基因敲除對AS小鼠體重的影響
        3.3. ERK5基因敲除對AS小鼠血脂的影響
        3.4. ERK5基因敲除對AS主動脈根斑塊大小的影響
        3.5. ERK5基因敲除對AS主動脈根斑塊處凋亡情況的影響
        3.6. ERK5基因敲除對AS主動脈上巨噬細(xì)胞胞葬作用相關(guān)信號分子基因表達(dá)情況的影響
        3.7. ERK5基因敲除對AS主動脈上巨噬細(xì)胞胞葬作用相關(guān)信號分子蛋白表達(dá)情況的影響
    4.分析和討論
        4.1. 動脈粥樣硬化的認(rèn)識
        4.2. 動脈粥樣硬化的形成機(jī)制
        4.3. 胞葬作用的相關(guān)信號分子
        4.4. ERK5和巨噬細(xì)胞胞葬功能
        4.5. ERK5的認(rèn)識
        4.6. ERK5-MKO/LDLR^-/-動脈粥樣模型小鼠
    5.小結(jié)
第二部分 冠心康對ERK5-MKO/LDLR^-/-動脈粥樣硬化小鼠巨噬細(xì)胞胞葬作用的影響
    1.實(shí)驗(yàn)耗材
        1.1. 實(shí)驗(yàn)動物
        1.2. 實(shí)驗(yàn)藥物
        1.3. 主要實(shí)驗(yàn)試劑、耗材
    2.實(shí)驗(yàn)方法
        2.1. 實(shí)驗(yàn)分組、飼養(yǎng)以及給藥方法
        2.2. 取材和組織保存
        2.3. 小鼠的一般情況及外周血脂水平的檢測
        2.4. 小鼠AS主動脈根晚期斑塊病理學(xué)的檢測
        2.5. Western blot檢測各組主動脈上巨噬細(xì)胞胞葬作用相關(guān)信號分子的蛋白表達(dá)量
        2.6. TRIzol法提取總RNA、反轉(zhuǎn)錄和實(shí)時定量PCR
        2.7. 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1. 冠心康對ERK5-MKO/LDLR^-/-動脈粥樣硬化小鼠體重的影響
        3.2. 冠心康對ERK5-MKO/LDLR^-/-動脈粥樣硬化小鼠血脂的影響
        3.3. 冠心康對ERK5-MKO/LDLR^-/-動脈粥樣硬化小鼠主動脈根斑塊大小的影響
        3.4. 冠心康對ERK5-MKO/LDLR^-/-動脈粥樣硬化小鼠主動脈根斑塊穩(wěn)定性的評價
        3.5. 冠心康對ERK5-MKO/LDLR^-/-動脈粥樣硬化小鼠主動脈根斑塊處細(xì)胞凋亡情況的影響
        3.6. 冠心康對ERK5-MKO/LDLR^-/-動脈粥樣硬化小鼠主動脈上巨噬細(xì)胞胞葬作用相關(guān)信號分子各基因表達(dá)情況的影響
        3.7. 冠心康對ERK5-MKO/LDLR^-/-動脈粥樣硬化小鼠主動脈上巨噬細(xì)胞胞葬作用相關(guān)信號分子各蛋白表達(dá)情況的影響
    4.討論
        4.1. AS易損斑塊的產(chǎn)生
        4.2. 巨噬細(xì)胞胞葬作用防治AS的研究進(jìn)展
        4.3. 中醫(yī)學(xué)對動脈粥樣硬化的認(rèn)識
        4.4. 冠心康抗動脈粥樣硬化的相關(guān)性研究
        4.5. 冠心康改善ERK5-MKO/LDLR^-/-小鼠的血脂異常
        4.6. 冠心康改善ERK5-MKO/LDLR^-/-小鼠的斑塊易損性
        4.7. 冠心康改善ERK5-MKO/LDLR^-/-小鼠的巨噬細(xì)胞胞葬功能
    5.小結(jié)
創(chuàng)新點(diǎn)
結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
    附錄一 文獻(xiàn)綜述 ERK5介導(dǎo)炎癥性疾病的研究進(jìn)展
        參考文獻(xiàn)
    附錄二 已發(fā)表文章
    附錄三
    附錄四 參與課題及學(xué)術(shù)會議



本文編號：3782469