發(fā)布時間：2022-08-23 11:21

　　研究背景及目的:晚期直腸癌預(yù)后不佳。腫瘤的免疫逃逸機(jī)制在其進(jìn)展和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。PD-L1和LAG-3等多種免疫檢查點(diǎn)分子參與了腫瘤逃逸機(jī)制。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)PD-L1和LAG-3表達(dá)于多種腫瘤微環(huán)境中,阻斷它們可起到協(xié)同抗腫瘤作用。本研究將分析直腸癌免疫微環(huán)境中PD-L1和LAG-3的表達(dá)情況,探討他們在直腸癌逃逸中的作用,以及在直腸癌模型上驗(yàn)證聯(lián)合阻斷的抗腫瘤效果,為臨床治療提供參考。方法:1、收集未進(jìn)行術(shù)前治療且有淋巴細(xì)胞浸潤的上段直腸癌標(biāo)本。通過免疫熒光方法檢測癌組織中的PD-L1和腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞上LAG-3表達(dá)情況,分析這些因素與臨床預(yù)后指標(biāo)的相關(guān)性以及意義;然后用免疫組化檢測腫瘤PI3K、AKT因子的上調(diào)水平,了解腸癌腫瘤細(xì)胞增殖情況;再將PD-L1、LAG-3與PI3K、AKT的表達(dá)情況進(jìn)行相關(guān)性分析,了解這兩個免疫檢查點(diǎn)對于腫瘤增殖的影響,探討PD-L1和LAG-3在免疫逃逸中可能的機(jī)制。2、先利用慢病毒沉默技術(shù)構(gòu)建PD-L1沉默慢病毒并轉(zhuǎn)染CT26直腸癌細(xì)胞,檢測其沉默效果;然后把該細(xì)胞皮下注射C57BL/6小鼠建立腫瘤模型,分成PD-L1沉默慢病毒組（接種PD-L1沉... 

【文章頁數(shù)】：119 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
英文縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 PD-L1和LAG-3在直腸癌免疫微環(huán)境中的表達(dá)和對免疫逃逸的意義
    1.實(shí)驗(yàn)材料
    2.實(shí)驗(yàn)方法
    3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.討論
    5.結(jié)論
第二部分 PD-L1和LAG-3聯(lián)合阻斷對直腸癌模型的影響
    (一)PD-L1沉默慢病毒的建立和測定
        1.實(shí)驗(yàn)材料
        2.實(shí)驗(yàn)方法
        3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    (二)建立轉(zhuǎn)染PD-L1沉默慢病毒的小鼠腸直腸癌模型和LAG-3阻斷干預(yù)
        1.實(shí)驗(yàn)材料
        2.實(shí)驗(yàn)方法
        3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.討論
        5.結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號：3677672