目的:1.檢測circEHMT1在乳腺癌中的表達(dá);2.分析circEHMT1在乳腺癌中發(fā)揮的功能;3.探討circEHMT1發(fā)揮功能的分子機(jī)制。方法:1.采用qRT-PCR在42對乳腺癌及癌旁組織中檢測circEHMT1的表達(dá)量,繪制ROC曲線;采用qRT-PCR在7種乳腺癌細(xì)胞中檢測circEHMT1的表達(dá)量;2.采用CCK8實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞劃痕愈合實(shí)驗(yàn)、Transwell遷移實(shí)驗(yàn)、Matrigel侵襲實(shí)驗(yàn)研究circEHMT1對乳腺癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲功能的影響。建立小鼠的乳腺癌肺轉(zhuǎn)移模型,使用納米顆粒載體將circEHMT1轉(zhuǎn)入體內(nèi)進(jìn)行治療,通過小動物活體成像、HE染色觀察小鼠肺轉(zhuǎn)移情況;3.通過數(shù)據(jù)庫分析和文獻(xiàn)檢索,找到與circEHMT1有結(jié)合位點(diǎn)的miRNA和下游靶基因,通過qRT-PCR、Western Blot、雙熒光素酶報(bào)告試驗(yàn)研究其發(fā)揮抑癌作用的分子通路。結(jié)果:1.circEHMT1在乳腺癌組織中的表達(dá)量顯著低于配對的癌旁組織,其ROC曲線下面積為0.8645,非常接近1,提示circEHMT1表達(dá)水平降低與乳腺癌的發(fā)生密切相關(guān);2.過表達(dá)circEHMT1對乳腺癌細(xì)胞... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

確定circEHMT1頭尾相連的剪接位點(diǎn)Figure1.1Confirmationofthesplicejunctionofthehead-to-tailconstructionofcircEHMT1.

重慶醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文15線下面積（AUC）為0.8645（95％置信區(qū)間（CI）=0.7898-0.9392）（圖1.2B）圖1.2A.cricEHMT1在人乳腺癌與配對癌旁組織中的表達(dá)水平，n=42。B.ROC曲線分析circEHMT1在乳腺癌組織中表達(dá)水平的臨床意義。P<0.0001,AUC=0.8645,95%CI:0.7898-0.9392.Figure1.2A.TheexpressionofcircEHMT1inpairedhumanbreastcancertissuesandadjacentnormalbreasttissues.n=42pairs.B.ROCanalysisshowingtheexpressionlevelsandclinicalsignificanceofcircEHMT1inbreastcancer.2.3circEHMT1在人乳腺癌細(xì)胞株的表達(dá)水平降低我們在7種人類乳腺癌細(xì)胞株（ZR-75-1，MCF-7，MB-468，T47D，SK-BR-3，MDA-MB-231和BT-549）中檢測circEHMT1的表達(dá)水平，對照細(xì)胞株選取正常人乳腺上皮細(xì)胞株（HMEpC）（圖1.3）。qRT-PCR結(jié)果表明，和HMEpC細(xì)胞相比，circEHMT1在七個乳腺癌細(xì)胞株的表達(dá)水平明顯降低。圖1.3circEHMT1在人乳腺癌細(xì)胞株與正常人乳腺上皮細(xì)胞株的相對表達(dá)水平Figure1.3TherelativeexpressionofcircEHMT1inhumanbreastcancercelllinesandnormalhumanmammaryepithelialcellline.

重慶醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文15線下面積（AUC）為0.8645（95％置信區(qū)間（CI）=0.7898-0.9392）（圖1.2B）圖1.2A.cricEHMT1在人乳腺癌與配對癌旁組織中的表達(dá)水平，n=42。B.ROC曲線分析circEHMT1在乳腺癌組織中表達(dá)水平的臨床意義。P<0.0001,AUC=0.8645,95%CI:0.7898-0.9392.Figure1.2A.TheexpressionofcircEHMT1inpairedhumanbreastcancertissuesandadjacentnormalbreasttissues.n=42pairs.B.ROCanalysisshowingtheexpressionlevelsandclinicalsignificanceofcircEHMT1inbreastcancer.2.3circEHMT1在人乳腺癌細(xì)胞株的表達(dá)水平降低我們在7種人類乳腺癌細(xì)胞株（ZR-75-1，MCF-7，MB-468，T47D，SK-BR-3，MDA-MB-231和BT-549）中檢測circEHMT1的表達(dá)水平，對照細(xì)胞株選取正常人乳腺上皮細(xì)胞株（HMEpC）（圖1.3）。qRT-PCR結(jié)果表明，和HMEpC細(xì)胞相比，circEHMT1在七個乳腺癌細(xì)胞株的表達(dá)水平明顯降低。圖1.3circEHMT1在人乳腺癌細(xì)胞株與正常人乳腺上皮細(xì)胞株的相對表達(dá)水平Figure1.3TherelativeexpressionofcircEHMT1inhumanbreastcancercelllinesandnormalhumanmammaryepithelialcellline.


本文編號：3501257