目的:調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）是具有抑制免疫反應(yīng)和免疫自穩(wěn)功能的一類T細(xì)胞亞群,通過發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)功能而防止自身免疫病的發(fā)生。Treg細(xì)胞保證其譜系特性的核心是持續(xù)的Foxp3蛋白表達(dá)和發(fā)揮免疫抑制功能。探索維持Treg譜系穩(wěn)定性的調(diào)控網(wǎng)絡(luò),具有重要的理論價(jià)值和臨床應(yīng)用前景。研究發(fā)現(xiàn)Lkb1可通過控制T細(xì)胞發(fā)育及活化以維持機(jī)體免疫平衡,而對(duì)Lkb1在Treg中的功能機(jī)制研究仍是一片空白。我們的前期數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)在TCR刺激下Treg胞內(nèi)Lkb1蛋白水平上調(diào),提示Lkb1可能在調(diào)控Treg免疫調(diào)節(jié)功能中發(fā)揮作用。本研究將探索Lkb1對(duì)Treg細(xì)胞生物學(xué)功能及免疫平衡的調(diào)控作用及其分子機(jī)制,為臨床上免疫性疾病的治療策略提供科學(xué)依據(jù)。方法:構(gòu)建Treg特異性Lkb1敲除小鼠（Foxp3Cre-YFPLkb1f/f）;觀察野生型（Fop3Cre-YFP,WT）及Lkb1條件敲除（cKO）小鼠一般體征,分析淋巴器官和細(xì)胞特征、各器官病理及觀察生存期;流式細(xì)胞術(shù)檢測小鼠T細(xì)胞極化和活化情況,Treg比例、數(shù)量、凋亡水平、細(xì)胞周期分析及轉(zhuǎn)錄因子磷酸化水平;構(gòu)建Foxp3CreAMPKa1/fAMPKa2f/... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：110 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１．?Ｌｋｂｌ蛋白在ＴＣＲ刺激后在Ｔｒｅｇ中上調(diào)??＋－＋＋－

圖２．構(gòu)建并驗(yàn)證Ｔ，．ｅｇ細(xì)胞特異性敲除Ｌｋｂｌ的基因編輯小鼠模型??（Ａ）構(gòu)建仏嘩５＆＜：—ＹＦＰＺ姑７ｆ／ｆ條件性基因敲除小鼠示意圖；（Ｂ）Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ檢測Ｌｋｂｌ??白在／＇〇Ａｙ３Ｇ？ＹＦＰ與八Ｕｐ３ｅｎ＞ＹＦＰａＷｆ／ｆ小鼠脾臟Ｔ＿與Ｔｒｅｇ細(xì)胞中的表達(dá)水平。??．?細(xì)胞中Ｌｋｂｌ特異性敲除導(dǎo)致小鼠出生后４０天內(nèi)死亡??相比野生型小鼠，嚴(yán)敲除小鼠出生后即表現(xiàn)為體型??小、活動(dòng)減少、弓背、塌耳和尾部多處皮膚潰瘍，體重不隨年齡増加等體征（圖??

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本文編號(hào)：3450318